串联质谱法的原理是什么?
- 样品首先通过适当的离子化技术(如电喷雾离子化 ESI、基质辅助激光解吸/电离 MALDI、或电感耦合等离子体 ICP)转化为气态离子。
- 这一步是非常重要的,因为质谱分析是通过分析气态离子来进行的。
- 这些离子被引入到质谱仪中,并根据它们的质荷比(m/z)被分离。常用的分离技术包括四极质谱仪、飞行时间质谱仪(TOF)和离子阱。
- 结果是一个质谱图,显示了不同质荷比的离子的相对丰度。
- 在串联质谱中,特定的前体离子(即来自第一级质谱分析的特定 m/z 离子)被选定进一步分析。
- 这种选择通常是基于离子的丰度或因为它们可能代表了感兴趣的特定化合物。
- 选定的前体离子被引导到碰撞细胞中,与惰性气体(如氩或氦)碰撞,导致离子碎裂。
- 除了 CID,还有其他碎片化技术,如电子转移解离(ETD)、激光诱导解离(LID)和表面诱导解离(SID)等。
- 碎片离子(即来自前体离子碎裂的离子)再次根据质荷比进行分离和检测。
- 这生成了一个碎片离子图或串联质谱图,提供了有关原始分子结构的详细信息。
串联质谱(也称为 MS/MS 或 MS2)通过在系列化的两个或更多的质谱分析步骤中分离和检测离子,以获得有关分子的详细信息。这种方法特别适用于鉴定复杂样品中的分子,例如蛋白质、肽或其他有机化合物,并且在生物化学、药物研究、环境科学等领域中有广泛应用。以下是串联质谱的基本原理:
1.离子化:
2.第一级质谱分析(MS1):
3.离子选择:
4.碰撞诱导解离(CID)或其他碎片化技术:
5.第二级质谱分析(MS2):
通过解析这些数据,研究人员可以鉴定出特定分子的组成、序列或结构,这对于理解复杂生物样品、确定未知化合物、验证化学合成产物等都是非常有价值的。
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