蛋白质串联质谱鉴定
蛋白质串联质谱技术(Tandem Mass Spectrometry,MS/MS)是一种基于质谱技术的高效、精准、灵敏的蛋白质定性、定量鉴定方法,广泛应用于蛋白质组学研究、生物药品质量控制、疾病标志物发现等领域。其通过对蛋白质的酶解产物(肽段)进行质谱分析,实现目标蛋白质的鉴定,包括对未知蛋白质的鉴定。该技术产生于20世纪90年代初,起初以液相色谱与质谱联用为主(LC-MS/MS),随着基质辅助激光解吸电离(MALDI)等技术发展,蛋白质质谱鉴定进入了一个新时代。现如今串联质谱技术已成为蛋白质组学研究的重要手段,对于解析复杂生物样品中蛋白质结构与功能具有重要意义,有助于揭示生物体内蛋白质相互作用、信号传导机制,推动生物科学的发展和疾病治疗的进步。
百泰派克生物科技BTP蛋白质串联质谱鉴定技术流程
1.样品准备:
根据实际情况选择合适的方法(如高效液相色谱或凝胶电泳等)对客户提供的蛋白质样品进行纯化、浓缩和脱盐处理,以去除杂质并提高蛋白质纯度。
2.蛋白质酶解:
将纯化的蛋白质进行多重酶解,将蛋白质切割成多肽片段,便于后续质谱分析。
3.肽段分离:
采用纳米高效液相色谱(nano-HPLC)对肽段进行分离,有效提高分辨率和检测灵敏度。
4.串联质谱分析:
我们采用高分辨率、高灵敏度的质谱仪(Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos,Orbitrap Exploris 240)通过串联质谱(MS/MS)对分离的肽段进行质量和碎片离子分析。
5.数据分析:
采用专业的数据处理软件Mascot和蛋白质数据库进行肽段的质量匹配和碎片离子搜索,最终实现蛋白质鉴定,包括蛋白质名称、氨基酸序列、匹配得分等详细信息。
蛋白质串联质谱鉴定技术的主要应用
1.高通量蛋白质鉴定:
串联质谱在蛋白质组学研究中发挥着关键作用,用于鉴定和定量生物样品中的蛋白质,揭示蛋白质的表达差异、相互作用和功能。
2.翻译后修饰研究:
用于鉴定蛋白质的翻译后修饰(如磷酸化、乙酰化、糖基化等),揭示修饰对蛋白质功能和信号传导的影响。
3.蛋白质相互作用研究:
通过鉴定蛋白质复合物中的组分,揭示蛋白质间的相互作用关系,为生物信号通路研究提供依据。
4.蛋白质结构分析:
MS/MS技术可以分析蛋白质的一级结构(氨基酸序列)和部分二级、三级结构信息,为蛋白质结构研究提供参考数据。
5.疾病诊断和生物标志物研究:
MS/MS技术可以用于疾病相关蛋白质的鉴定和定量,为疾病诊断和预后评估提供依据。
关于样品
样本类型 |
细胞裂解物 |
组织提取物 |
体液样品 |
基因表达产物 |
蛋白质复合物 |
样本数量 |
50-200ug |
100-500ug |
10-100ug |
1-10ug |
5-50ug |
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 蛋白质串联质谱鉴定详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
蛋白质串联质谱鉴定一站式服务
您只需下单-寄送样品
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