蛋白分析FAQ汇总

• • SDS-PAGE蛋白电泳加样孔处漏样？

  如果在加样孔处出现漏样的情况，可能有以下几种原因： 1. 凝胶制备问题：如果凝胶制备不当，可能会导致凝胶孔洞过大，从而导致样品在加样过程中漏出。 2. 加样技术问题：如果加样技术不熟练，可能会导致样品在加样过程中漏出。 3. 样品过多：如果加入的样品过多，也可能会导致样品在加样过程中漏

• • GFP蛋白提纯 FPLC后SDS page一直有两个band，如何精确提纯？

  如果GFP蛋白在经过快速蛋白液相色谱（FPLC）提纯后在SDS-PAGE上出现两个band，可能有几种原因： 部分蛋白降解：这可能导致出现比预期分子量小的额外条带。 翻译后修饰：例如，磷酸化、糖基化等可能增加蛋白的分子量。 异构体或多态性：GFP的某些形式可能存在不同的构象或异构体。 其他

• • SDS-PAGE电泳，蛋白marker跑不开，这是为什么？

  SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质分析技术，它可以根据蛋白质的分子量进行分离。在这个过程中，蛋白质标记（Protein Marker）是非常重要的，它可以作为参照物来确定样品

• • 为什么 SDS-PAGE 电泳前要煮蛋白？

  SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis）电泳是一种常用的蛋白质分离技术。在进行SDS-PAGE电泳前煮蛋白的原因可以从以下几个方面来解释： 1. 蛋白质变性 通过加热和SDS的作用，蛋白质的三维结

• • 做蛋白质的sds-page电泳为什么脱完色没有条带？

  SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质分析方法，通过电泳可以将蛋白质按照分子量大小进行分离。如果在SDS-PAGE电泳后，脱色没有条带，可能有以下几种原因： 1. 样品处理问题

• • 请问可以通过质谱鉴定出病毒粒子上的蛋白吗

  质谱技术是一种基于离子质量分析的方法，可以对病毒粒子上的蛋白质进行定性和定量鉴定。通过样品的准备、液相色谱-串联质谱分析和蛋白质数据库搜索，可以确定病毒上的蛋白质组成及其相互作用。

• • 怎么对蛋白胶条进行测定？

  详细描述了利用质谱技术对蛋白胶条进行测定的各个步骤，包括胶条切割、蛋白消化、质谱分析及数据的整理和分析。

• • SDS不连续系统电泳测蛋白质相对分子质量一般有什么局限的地方吗？

  SDS不连续系统电泳是一种常用的方法来测定蛋白质的相对分子质量。它通过使用SDS（十二烷基硫酸钠）来给蛋白质赋予负电荷，使其在电场中按照大小分离。 然而，SDS不连续系统电泳测蛋白质相对分子质量也存在一些局限性： 只能测定相对分子质量较大的蛋白质：SDS不连续系统电泳主要适用于相对分子质量

• • Western 印迹法中，硝酸纤维素膜上的蛋白质，已经被SDS变性，为什么一抗还能识别？一抗识别的是什么？

  在Western印迹法中，如果硝酸纤维素膜上的蛋白质已经被SDS变性，但一抗仍然能够识别，可能的原因是： 1.蛋白质转移与膜结合后的结构： 当蛋白被转移到硝酸纤维素膜上时，它们会紧紧地与膜结合。这种结合可能会导致部分蛋白的二级结构或三级结构在一定程度上恢复，从而使某些表位重新暴露出来 2.

• • 用SDS-凝胶电泳法测定蛋白质分子量时，有哪些注意事项？

  SDS-PAGE凝胶电泳法是测定蛋白质分子量最常用最简单的方法，其实验结果也容易受到多方面的影响，因此操作时也需要注意以下注意事项： 样品制备： 确保蛋白质完全变性：在样品中加入适量的SDS和减少剂（如β-mercaptoethanol或DTT）并在推荐的温度下加热一定时间，以确保蛋