蛋白分析FAQ汇总
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泛素化是一种翻译后修饰过程,通过将泛素(Ubiquitin)结合到蛋白质上,调控蛋白质的降解、信号传导和其他功能。目前常用的检测泛素化蛋白的方法主要有: 1.免疫印迹(Western Blot): 首先对细胞或组织样本进行蛋白质提取,然后通过SDS-PAGE进行蛋白
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在单个细胞水平上进行蛋白质组学研究是一项挑战性的工作,因为细胞内蛋白质的数量和复杂性较高,而单细胞的蛋白质总量相对较低。然而,随着科学技术的发展,研究人员已经发展了一些方法和技术,使单细胞蛋白质组学研究成为可能。单细胞蛋白质组学分析的一般流程如下: 1.单细胞分离:首先
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一般来说,western blot电泳液不应该重复使用。这是因为western blot电泳液中的成分(如Tris缓冲液、SDS、甲醛等)可能会因为使用后的蛋白质残留物、细胞残留物和其他杂质而失去活性,从而影响实验结果的准确性。 此外,使用过的电泳液可能会被污染,导致重
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液相色谱(HPLC,High-Performance Liquid Chromatography)是一种高效、精准的分离和定量分析技术,广泛应用于化学、制药、食品、环保、生物医学等领域。下面是液相色谱分析的基本步骤: 1.样品制备:首先需要对待测样品进行适当的前处理,如
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• 磷酸化蛋白质组学中蛋白的表达量是和磷酸化水平相关?还是活性相关?
磷酸化蛋白质组学(Phosphoproteomics)是一种研究蛋白质磷酸化修饰的方法,它可以帮助研究者了解细胞信号传导、调控和蛋白质功能。在磷酸化蛋白质组学中,蛋白质的表达量通常指的是蛋白质的总量,而磷酸化水平是指蛋白质分子中磷酸化位点的占比。蛋白质的活性则是指蛋白质在生物
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TQ-Orbitrap静电场轨道阱质谱仪(LTQ-Orbitrap mass spectrometer)是一种混合质谱仪,结合了线性离子阱(LTQ)和Orbitrap质量分析器。LTQ-Orbitrap常用于蛋白质组学、代谢物分析等领域。要分析LTQ-Orbitrap质谱数据
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• 蛋白组学筛选差异蛋白时,选用的标准中foldchange是否选择1.5倍以上才容易被编辑接受?
在蛋白质组学筛选差异蛋白时,通常会选择一些标准来判断哪些蛋白质的表达在不同样品之间有显著差异。fold change是一种常用的指标,用于比较两个样品之间的蛋白质表达水平的差异大小。一般情况下,fold change需要大于1.5倍才能被认为是差异表达的蛋白质。 然而,
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在气相色谱(GC, Gas Chromatography)分析中,溶剂峰可能会影响样品中待测物质的检测。要在气相色谱中切除溶剂峰,可以采取以下方法: 1.增加保留时间:调整色谱条件,如降低柱温或使用更长的色谱柱,以延长待测物质的保留时间。这样,待测物质的峰可以与溶剂峰分
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在液相色谱(HPLC,High Performance Liquid Chromatography)中,提高两个峰的分离度(分离因子,α)是关键。以下是一些建议和方法,可以帮助提高峰之间的分离度: 1.改变流动相:可以通过改变流动相的极性、组成或者缓冲液的pH值来调整色
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• 液相质谱分析采用内标法定量,负离子模式下内标物可以提出来,但正离子模式下内标物无法提出,该如何解决呢?
在液相质谱分析中,如果在负离子模式下内标物可以提出,但在正离子模式下无法提出,可能有以下原因: 1.内标物的化学性质:内标物在正离子模式下可能不容易被激发或者离子化。你可以尝试选择一个不同的内标物,以确保在正离子模式下也可以被检测到。 2.离子源条件:你可以尝试调
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