蛋白分析FAQ汇总

• • 四极质谱是如何运转的？

  四极质谱仪（Quadrupole Mass Spectrometer）是一种常用的质谱仪，它通过利用四极场对离子的筛选和检测来分析样品。四极质谱仪的工作原理可以分为以下几个步骤： 1.电离源：首先，将待分析的样品送入电离源（例如，电子轰击电离、化学电离或电喷雾电离）。电

• • 通过高通量芯片质谱法测蛋白，一般自己筛选好还是全蛋白组检测好呢？

  蛋白质质谱分析是一种强大的工具，可以用于鉴定和定量生物样品中的蛋白质。选择进行全蛋白组分析还是筛选特定蛋白质进行分析，主要取决于研究目标和可用资源。 1.全蛋白组分析：全蛋白组分析，即非靶向蛋白组学分析，通常用于发现新的或者未预期的蛋白质，例如在疾病和健康状态下的生物样

• • 蛋白二硫键鉴定和定量分析：这使用的什么方法？

  蛋白质中的二硫键（也称为二硫桥）是由两个半胱氨酸残基之间的硫原子形成的共价键，对于蛋白质的稳定性和功能至关重要。对二硫键的鉴定和定量分析可以帮助研究蛋白质的结构和功能。常用的二硫键鉴定和定量分析方法主要有： 1.质谱法：质谱技术（如MALDI-TOF和ESI-MS）在蛋

• • 蛋白免疫印迹中选择AnnexinⅤ作为内参的原因？回答中我需要知道是不是跟膜蛋白有关？

  在蛋白免疫印迹（Western blot）实验中，内参通常用于校正实验过程中可能发生的变异，如蛋白质加载量的差异。选择内参时，通常选择在实验条件下表达稳定、不受实验处理影响的蛋白质。常用的内参蛋白包括GAPDH、β-actin、α-tubulin和HSP90等。 关于选

• • （简答）在质谱图中判断分子离子峰的依据主要有哪些？

  在质谱图中判断分子离子峰（M+峰）的依据主要有以下几点： 1.碎片离子质量：分子离子峰通常具有最高的质量数（m/z），因为分子离子是未经裂解的完整分子。 2.氮规则：对于包含偶数个氮原子的化合物，其分子离子峰的质量数通常是偶数；对于包含奇数个氮原子的化合物，其分子

• • 相比二维电泳，iTRAQ等LC-MS为基础的蛋白组学技术有什么优势？

  相比二维电泳，基于液相色谱-质谱（LC-MS）的蛋白组学技术（如iTRAQ）在多个方面具有优势。以下是一些主要优点： 更高的通量：LC-MS技术比二维电泳更高效，可以在较短的时间内分析更多的样品。LC-MS实验可以在几小时内完成，而二维电泳可能需要一天或更长时间。 更广泛的动态范围：

• • 如何解读 kegg 结果中的数值？

  KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）是一个包含基因、蛋白质、代谢途径等多种生物信息的数据库。在进行富集分析（例如，基因富集分析或代谢物富集分析）时，我们经常使用KEGG路径来帮助解释实验结果。 使用KEGG进行富集分

• • WB转膜，apolipoprotein B(515KDa)转膜该怎么转，?

  Western blot（WB）是一种常用的生物技术方法，用于研究蛋白质的表达和修饰。对于高分子量蛋白，如apolipoprotein B (ApoB, 515 kDa)，转膜可能会遇到一些困难。以下这些建议可以帮助您成功地将ApoB从凝胶转移到膜上： 1.转膜缓冲液：

• • 质谱联用，可以得到什么。是未知物质的组成成分吗？

  质谱联用技术将质谱（MS）与其他分析技术（如色谱）结合，可以用于检测和分析多种类型的化学物质。这些物质包括有机化合物、生物大分子、药物、环境污染物等。常见的质谱联用技术有气相色谱-质谱（GC-MS）、液相色谱-质谱（LC-MS）、毛细管电泳-质谱（CE-MS）和离子色谱-质谱

• • 大肠杆菌表达的蛋白，经镍柱纯化之后，除盐，拿去打蛋白质质谱，为什么会出现聚合物的信号？

  在大肠杆菌中表达蛋白并通过镍柱纯化后，蛋白质质谱中出现聚合物信号的原因可能有以下几点： 1.蛋白质本身易于聚合：有些蛋白质在表达、纯化或储存过程中可能会自发地形成聚合物，如二聚体、三聚体等。这些聚合物可能是由于蛋白质结构的特性、氨基酸序列或疏水区域的相互作用导致的。