蛋白分析FAQ汇总

• • 如何提取磷酸化蛋白？

  磷酸化蛋白的提取需要特定的步骤和试剂，以确保在提取过程中磷酸化位点不会被去磷酸化，并且可以有效地富集和检测这些蛋白。可以下参考以下步骤： 1.制备磷酸化蛋白提取缓冲液：磷酸化蛋白提取缓冲液通常包括适量的盐、非离子表面活性剂、磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂。磷酸酶抑制剂（如钠

• • RNA pulldown 切下的胶送质谱如何切，如何存放？

  RNA pulldown 是一种常用的生物实验方法，通过这种方法，研究人员可以鉴定与特定 RNA 分子相互作用的蛋白质。对RNA pulldown 后的凝胶进行正确切割和储存对进一步的质谱分析非常重要。需注意： 1.在切割之前应先使用紫外光源或染料对凝胶进行染色，以便于

• • 请问圆二色谱的数据分析用什么软件啊

  圆二色谱（Circular Dichroism, CD）是一种用于研究蛋白质、核酸等生物大分子结构的光谱技术。分析圆二色谱数据的软件有很多，以下是一些常用的软件和工具： 1.CDPro：CDPro 是一款用于分析蛋白质二级结构的软件。它包含三个主要的程序：CONTIN、

• • 您好，如果质谱结果内没有自己过表达的蛋白，但送样前wb检测条带正常，这是否意味着质谱结果失败了呢

  质谱（Mass Spectrometry, MS）是一种高度敏感的分析技术，用于鉴定蛋白质和其他生物大分子。但它也可能出现假阴性或假阳性的结果。如果在质谱结果中没有检测到过表达的蛋白质，但Western blot（WB）结果正常，这并不一定意味着质谱结果失败。也有可能是一下原

• • 肽的质量指纹图谱和药效可以做谱效关系吗？用lcms的总离子流图的肽段相对定量和效做谱效关系，求指教。？

  是的，基于LC-MS的总离子流图的肽段相对定量和药效可以进行谱效关系研究。谱效关系（Spectrum-Effect Relationship）是一种研究药物、药材或复合物中各个成分与其生物活性关系的方法。该方法结合了化学成分分析与生物活性评价，旨在揭示药物中活性成分的类型和相

• • 绝对定量的标准品如何制作？

  绝对定量AQUA（Absolute QUAntification）方法是一种基于质谱的蛋白质定量技术，它通过使用同位素标记的合成肽段作为内部标准来实现蛋白质的准确定量。在绝对定量实验中，标准品的制备至关重要，因为它为实验提供了一个已知浓度的参考物质。以下是制备标准品的一般步骤

• • 什么是定量研究？

  定量蛋白质组学（Quantitative Proteomics）是一种研究蛋白质表达水平和功能的科学方法，通过收集和分析蛋白质组中的蛋白质定量数据来揭示生物体内的生物过程和相互作用。定量蛋白质组学结合了质谱技术、生物信息学和统计学方法，以全面了解蛋白质在细胞、组织和生物体中的

• • 请问目前最先进的蛋白质测序方法是什么？

  截止到2021年，最先进的蛋白质测序方法主要是基于质谱（MS）的技术，尤其是液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）方法。LC-MS/MS技术已成为蛋白质鉴定、定量和翻译后修饰分析等蛋白质组学研究的主流方法。然而，新的技术和方法仍在不断发展和改进。 近年来，基于质谱的蛋白质

• • 蛋白纯化过镍柱流速太慢怎么办？

  镍柱（Ni-NTA）是一种常用的蛋白纯化方法，通过与六个连续组氨酸残基（His-tag）结合来纯化带有His-tag的蛋白质。如果您在使用镍柱进行蛋白纯化时遇到流速过慢的问题，可以尝试以下方法： 1.检查柱塞和接头：确保柱塞和接头正确安装且无损坏。如果发现柱塞或接头有问

• • 质谱中峰高和物质含量有关吗?

  在质谱分析中，峰高（peak height）与物质的含量有密切关系，因为峰高是反映物质含量的重要参数之一。 在质谱分析中，样品中的物质被分离出来，然后通过质谱仪进行检测。每种物质的分子量和分子结构都会影响它在质谱中的信号强度。对于相同的样品，不同物质的分子量和分子结构不