SDS凝胶电泳测定蛋白质分子量时,为什么老师要我们两边不要点样(说什么倒电作用),求大神解答?
SDS凝胶电泳通过电泳将蛋白质分离并测定其分子量。在这个过程中,SDS(十二烷基硫酸钠)被用来给蛋白质样品添加负电荷,使其在电场中向阳极迁移。在SDS凝胶电泳中,电泳缓冲液中的离子会在电场作用下向阳极或阴极迁移。当样品点在凝胶两边时,电泳缓冲液中的离子会在样品点周围聚集,形成电场梯度。这个电场梯度会导致样品点周围的离子向样品点迁移,产生倒电作用。
倒电作用会导致凝胶中的蛋白质在电泳过程中发生扩散,使得蛋白质带宽变宽,分离效果变差。特别是对于较小的蛋白质分子量,倒电作用会更加明显。
为了避免倒电作用,最好两边不要点样。这样可以减少电场梯度的形成,减少倒电作用的影响,从而提高蛋白质分子量的测定准确性和分离效果。
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