2D Blue Native/SDS-PAGE复合物分析服务

    在生物膜中,许多蛋白质以复合物形式组成。百泰派克生物科技可利用2D Blue Native/SDS-PAGE对这些蛋白质复合物的亚基进行全局分析。2D BN/SDS-PAGE分析中,样品通过蓝色native聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行一维分离,然后通过SDS-PAGE进行二维分离。

    2D Blue Native SDS-PAGE复合物分析服务

    2D Blue Native SDS-PAGE复合物分析服务

    蛋白质复合物在时间和空间的所有复杂层面上都可以组织并维持细胞和细胞器的功能,包括细胞发育和分裂、转录和翻译、呼吸作用和光合作用、转运和代谢。蛋白质复合物可能表现出部分和暂时性变化,并且表现出不同的稳定性,使鉴定和分析难以顺利进行。BN-PAGE是用于蛋白质复合物高分辨率分离的技术。BN-PAGE可用于确定蛋白质复合物的大小、相对丰度和亚基组成分析。

    在2D BN-PAGE分析中,蛋白质或蛋白质复合物样品在自然条件下在1D BN-PAGE中分离,考马斯亮蓝染料带有负电荷,与所有蛋白质非特异性结合。考马斯亮蓝不作为洗涤剂使用,从而保留了蛋白质复合物的结构。另外,考马斯亮蓝的结合降低了电泳过程中蛋白质聚集的趋势。因此,样品的电泳迁移率取决于结合的考马斯亮蓝的负电荷以及复合物的大小和形状。通过BN-PAGE分离后,蛋白质和蛋白质复合物样品在凝胶中通过SDS变性,然后再进行2D SDS-PAGE凝胶电泳分离。

    BN-PAGE和SDS-PAGE的结合,因为一维中的梯度凝胶和二维中的线性凝胶,单体蛋白质将以双曲线对角线迁移,而蛋白质复合物的组成成分位于该对角线以下。代表同一蛋白质复合物亚基的蛋白质可以在二维的一条垂直线中找到,而同一蛋白质在水平线中的多个斑点表明该蛋白质同时存在于几种不同的蛋白质复合物中。
    2D BN/SDS-PAGE分析可以提供有关样品的大小、数量、蛋白质组成、化学计量和相对丰度的信息,是研究蛋白质复合物的有用工具。

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