灭活疫苗病毒结构蛋白序列表征
灭活疫苗是一种常见的疫苗类型,它们是通过采集病原微生物(如病毒或细菌),然后通过物理或化学方法使其丧失病原性,即不能再引发疾病,但仍能激发免疫反应的疫苗。这些疫苗保留了病原体的表面抗原,但已经失去了病原体的活性,这些抗原可以刺激免疫系统产生针对性的免疫反应,从而帮助预防疾病。对于病毒灭活疫苗来说,病毒的结构蛋白是其重要的组成成分。病毒的结构蛋白主要包括病毒的表面蛋白和核壳蛋白。这些蛋白质是病毒生命周期和病毒感染宿主的关键因素,也是疫苗引发免疫反应的主要靶点。这些结构蛋白质的序列,即其氨基酸序列,是确定抗原蛋白功能的基础,对灭活疫苗类药物进行病原体结构蛋白的氨基酸序列鉴定,不仅可以确保疫苗的质量和有效性,还有助于理解和预测免疫反应,监控病毒变异,以及疫苗的改进和开发。
常用的蛋白质序列分析方法主要包括质谱法和非质谱法(Edman降解法)两类。
Edman测序又称Edman降解法测序,是由埃德曼在上世纪50年代创立的用于测定蛋白质一级结构的方法。Edman测序基本原理是将蛋白多肽的N端氨基酸用化学方法依次断裂,每次只断裂一个氨基酸,通过高效液相色谱(HPLC)分析断裂后氨基酸片段,再将少了一个氨基酸的多肽链回收,重复进行以上操作,直到最后鉴定出整条多肽链的氨基酸排列顺序。
质谱法是目前使用最为广泛的一种蛋白质序列分析方法,基于质谱的蛋白质序列分析结合对应算法和生物信息学技术,可以实现蛋白的N/C末端序列分析、全序列分析和从头测序分析,其可用于已知蛋白的表达验证和未知蛋白的氨基酸序列分析。基于质谱的蛋白序列分析通过特异性蛋白酶将目标蛋白酶切为肽段,再经过MS/MS或LC-MS/MS检测得到肽段二级质谱图,解析谱图获得肽段的氨基酸序列,最后根据肽段间的重合互补性完成各肽段的拼接,由此可实现完整蛋白质的序列分析。
生物制品表征蛋白序列分析示意图
百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们可为您提供基于高分辨质谱平台以及岛津公司Edman测序系统的灭活疫苗类药物蛋白序列表征服务。以质谱为基础的测序技术可以实现对N端封闭和PEG化蛋白的序列测定,与Edman测序形成互补,可精确测定病原体结构蛋白的N末端、C末端以及全长氨基酸序列,包括翻译后修饰情况。百泰派克生物科技还可根据需求提供定制化技术服务,欢迎免费咨询。
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