抗体药物N端测序
抗体药物主要是指利用人工合成或生物工程技术生产的模拟人体免疫系统中自然产生的抗体的药物。这些药物可以特异性地识别并结合到体内的特定目标(通常是蛋白质),从而实现治疗效果。抗体药物的种类繁多,如单克隆抗体(mAbs)、双特异性抗体(bispecific antibodies)、抗体药物偶联物(ADCs)等。N端测序是一种分析蛋白质、多肽以及抗体N末端氨基酸序列的方法,对于抗体药物来说,N端测序尤为重要。因为抗体是由两个重链和两个轻链通过二硫键连接起来的复杂蛋白质,每条链的N端(即氨基端)的序列对于抗体的特异性结合能力至关重要。通过N端测序,我们可以确保抗体的氨基酸序列正确,没有错误的氨基酸残基,也没有意外的化学修饰。
目前,N端测序通常使用Edman降解法进行。这种方法是通过连续的化学反应,逐个去除抗体的N端氨基酸,并对每个去除的氨基酸进行识别。这个过程可以重复进行,直到得到足够长的氨基酸序列。然而,这种方法比较耗时,并且需要足够大量的抗体样品。
生物制品表征N端测序示意图
除了Edman降解法,质谱技术(尤其是串联质谱)也被广泛用于抗体蛋白质的氨基酸序列分析,质谱法将抗体蛋白消化成5-25个氨基酸的肽,随即通过LC-MS/MS分析检测,将采集的数据与理论序列数据库进行匹配,进而确认N端序列。质谱可以测出封闭和修饰的抗体蛋白药物N末端,且已成为首选的全长抗体测序方法。Edman降解法与质谱法不同,其不需要借助蛋白数据库便可以直接进行序列分析。但它不能用于N-末端封闭或修饰后的氨基酸残基。
百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们可为您提供基于高分辨质谱平台以及岛津公司Edman测序系统的抗体药物N端测序服务。以质谱为基础的N端测序技术可以实现对N端封闭和PEG化蛋白的序列测定,与Edman测序形成互补。此分析可以用于确认抗体蛋白类药物是否得到完整表达,检测抗体蛋白类药物表达过程是否发生断裂,以及抗体蛋白类药物N端序列是否发生修饰等。百泰派克生物科技还可根据需求提供定制化技术服务,欢迎免费咨询。
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