重组蛋白质药物N端测序

    重组蛋白质药物是由两个或更多的氨基酸通过肽键连接而形成的生物活性化合物。与多肽类药物相比,它们通常由更多的氨基酸组成,分子量更大,结构更复杂。蛋白质类药物可以是自然存在的,如许多体内酶和免疫球蛋白,也可以是通过基因工程技术人工设计和生产的,如单克隆抗体和重组蛋白疫苗。

     

    重组蛋白表达纯化产物的分析过程,特别是重组蛋白药物的研发和工艺建立过程,需要对重组蛋白质药物的N端序列进行确认。目前,测定蛋白质类药物N末端的方法主要有Sanger法、酶降解法、Edman法、二硝基氟苯法(FDNB法)、丹磺酰氯法(DNS法)和基于质谱的方法,其中Edman法和质谱法在N末端序列分析中应用最广。

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    生物制品表征N端测序示意图

     

    质谱法将蛋白消化成5-25个氨基酸的肽,随即通过LC-MS/MS分析检测,将采集的数据与理论序列数据库进行匹配,进而确认N端序列。质谱可以测出封闭和修饰的蛋白药物N末端,且已成为首选的全长抗体测序方法。Edman降解法与质谱法不同,其不需要借助蛋白数据库便可以直接进行序列分析。但它不能用于N-末端封闭或修饰后的氨基酸残基。

     

    百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们为您提供基于高分辨质谱平台以及岛津公司Edman测序系统的重组蛋白质药物N端测序服务。以质谱为基础的N端测序技术可以实现对N端封闭和PEG化蛋白的序列测定,与Edman测序形成互补。此分析可以用于确认重组重组蛋白质药物是否得到完整表达,检测重组重组蛋白质药物表达过程是否发生断裂,以及重组重组蛋白质药物N端序列是否发生修饰等。百泰派克生物科技还可根据需求提供定制化技术服务,欢迎免费咨询。

    百泰派克生物科技重组蛋白质药物表征内容

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