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Top-Down蛋白质组学的优势与局限:完整结构信息的代价与突破 随着蛋白质组学研究不断迈向更高分辨率与更细结构层级,Top-Down蛋白质组学(Top-Down Proteomics, TDP)因其对完整蛋白质进行直接质谱分析的能力,正在成为研究蛋白质异构体、翻译后修饰及功能多样性的关键工
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• Top-Down LC-MS/MS全流程解析:如何实现高效蛋白质鉴定?
Top-Down蛋白质组学(Top-Down Proteomics, TDP)是通过对完整蛋白质分子的直接分析,实现蛋白质全序列、结构修饰和异构体(proteoform)的全面解析。与Bottom-Up方法相比,Top-Down技术能够更加准确地捕捉蛋白质的天然状态,尤其适用于研究翻译后修饰
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毒液是蛇、蜘蛛、蝎子、蜥蜴等毒性动物通过专门腺体产生的复杂生化混合物,广泛含有蛋白质、多肽、酶和小分子。其成分结构多变、功能独特,是天然小分子药物库的重要来源。然而,毒液成分常常以不同翻译后修饰形式(proteoform)同时存在,结构差异细微,却决定截然不同的毒理功能。因此,在毒液组学研究
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多肽组学(peptidomics)作为质谱(mass spectrometry)驱动的生命科学分支,能全面分析体内天然存在的短肽或多肽片段。这些片段往往携带疾病特异性信息,是癌症早期诊断和疗效监测的新兴生物标志物来源。本文将从技术基础、应用前沿和发展趋势三方面系统解析多肽组学在癌症检测中的潜
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iTRAQ同位素标记技术,可对样本中的肽段 N 端与赖氨酸侧链进行共价标记,通过 4-plex 或 8-plex 多重标记,实现多样品同时定量。在质谱二级图谱(MS/MS)中,这些同质异构的标签裂解产生特征 reporter 离子,可用于精确比较不同处理组的肽丰度。基于 iTRAQ 技术的肽
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蛋白质水平的表达变化是揭示生物过程、疾病机制和药物作用的重要切入点。然而,由于蛋白质本身的复杂性和表达动态范围广,如何实现精确且可重复的蛋白定量一直是蛋白质组学的技术挑战。稳定同位素标记的细胞培养法(SILAC)应运而生,作为一种代谢标记策略,它通过在细胞培养阶段引入重同位素标记氨基酸,实现
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• Orbitrap还是FT-ICR?Top-Down质谱分析平台全解析
Top-Down质谱因其对完整蛋白质的直接分析能力,在蛋白质组学、结构生物学和翻译后修饰研究中逐渐成为不可或缺的工具。面对复杂蛋白亚型、修饰多态性和高质量精度需求,选择合适的质谱平台尤为关键。Orbitrap与FT-ICR是当前主流的两种高分辨率分析平台,各具技术优势,适用场景存在显著差异。
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• SILAC定量蛋白质组学全流程解析:从同位素标记到质谱定量
在众多定量蛋白质组学技术中,SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)以其高精度、低偏倚的特性,在细胞水平的蛋白表达比较中占据重要地位。通过在细胞培养阶段引入稳定同位素标记氨基酸,SILAC实现了蛋白质的"天然"
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解析蛋白表达的动态变化是理解疾病机制、药物靶点发现和细胞生物学的重要基础。然而,蛋白质定量方法(如染料标记、Western blot或非标记定量)往往存在批间差异大、定量精度低、重复性差等问题。SILAC技术(Stable Isotope Labeling by Amino acids in
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蛋白质组学定量分析是科研、药物开发、疾病机制研究等领域的核心技术。而 SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)以其“体内代谢标记”“高准确度”“低处理误差”三大优势,已成为常用标准方法。本文将从科学原理、实验流
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