WB测通路蛋白，只测了磷酸化的蛋白，没有检测总量，问题大不大？
对于这个问题，答案取决于研究的目标以及实验的设计。总体上来说，不同时测定蛋白的总量和磷酸化状态可能对实验结果的解释产生一定影响：
1.基素水平的蛋白质表达量
总蛋白检测可以作为一种控制，了解你的目标蛋白在样本中的基础表达量。如果你的样本中没有总蛋白的检测，你可能不确定观察到的磷酸化水平改变是否是由于磷酸化程度的改变，或仅仅是因为蛋白质本身表达量的改变。也就是说，如果一种蛋白质的磷酸化水平看起来较高，这可能是因为这种蛋白质本身就存在更多（而不一定是更多的蛋白质被磷酸化）。
2.结果的定量可比性
如果我们只检测磷酸化蛋白，而不检测总的蛋白量，我们可能无法对不同条件下的磷酸化水平进行有效比较。总蛋白检测为我们提供了一种基线，可以对比不同试验条件下磷酸化蛋白的水平，这在定量研究中是非常重要的。
3.实验变异的控制
总蛋白的检测也可以用作技术控制。如果所有样本的总蛋白水平一致，那么任何观察到的变化都可以归因于磷酸化水平的变化，而非其它实验变量。这有助于确保我们观察到的结果是真实的，不受实验方法的影响。
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