如何测试蛋白是否是糖基化
蛋白质糖基化修饰是糖链在糖基转移酶的催化作用下转移至蛋白质侧链氨基酸残基上的过程,蛋白质糖基化修饰的产物是糖蛋白。如何测试蛋白是否是糖基化?最直接的方法是检测蛋白质糖基化的产物,即糖蛋白的检测,主要包括糖蛋白的鉴定、糖蛋白分离纯化、糖基化修饰位点鉴定以及糖组成的确定和糖含量的测定等内容。
目前常用的鉴定蛋白是否被糖基化的技术包括放射性标记法、电泳法、凝集素标记法、荧光印记法、半乳糖转移酶标记法等标记方法和质谱法(MS)。
其中,基于质谱平台的检测方法具有通用性好、特异性强、灵敏度高等优点,可以排除大多数未被修饰蛋白的影响,是测试蛋白是否是糖基化最常用的方法。然而,使用质谱法检测蛋白质糖基化修饰有糖基化不稳定、肽链离子化效率低等缺点。为了避免此类问题,可通过对样本中的糖基化修饰后的糖蛋白肽段富集后进行上机测样。
百泰派克生物科技采用MALDI TOF MS高分辨质谱系统和UHPLC技术提供糖蛋白分析服务,该服务可用于鉴定血浆/血清、细胞、组织或生物体表达的全部糖基化修饰,所有与蛋白质连接的聚糖都将通过酶消化水解,通过亲水色谱法分离后,使用质谱系统进行定量分析。您只需将实验目的告知并将样品寄出,我们将负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
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