蛋白糖基化修饰检测
蛋白糖基化修饰
蛋白糖基化修饰是一种常见的、重要的蛋白质翻译后修饰，是蛋白质在合成中或合成后在特定氨基酸位点与寡糖或聚糖以糖苷键共价结合的过程。根据糖基化发生的氨基酸位点可以将其分为N-连接糖基化和O-连接糖基化。
糖基化对蛋白质的结构、定位和活性等方面有重要影响，进而影响蛋白质的生物学功能。糖基化蛋白质在细胞识别、细胞分化、信号传导以及免疫应答等生命现象中起着重要的作用。
蛋白糖基化修饰检测
蛋白糖基化修饰是最复杂的修饰方式之一。蛋白糖基化修饰检测主要研究蛋白质是否发生了糖基化以及在哪个氨基酸位点发生何种糖基化。其大致策略是先检测或确定糖蛋白的存在并对其进行富集分离，常用的方法有电泳法、色谱法和肼化学富集法等；然后对收集的糖蛋白进行糖基化氨基酸位点鉴定，主要利用生物质谱结合蛋白酶或专一性糖苷内切酶的作用来开展，将糖基化位点进行特异的质量标记使之与未发生糖基化的蛋白质之间存在一定的质量差异，通过质谱分析检测这些差异，进而通过串联质谱鉴定该糖基化修饰发生的氨基酸位点；最后进行糖链结构鉴定以确定发生的糖基化类型，这是整个鉴定工作中最难最复杂的一步，目前主要采用基质辅助激光解吸电离质谱（MALDI-TOF-MS）和核磁共振（NMR）技术进行研究。
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