互作蛋白的筛选
蛋白的生理功能通常是通过蛋白与蛋白之间的相互作用来实现的,与靶向目标蛋白发生相互作用的蛋白称之为互作蛋白,互作蛋白的筛选是蛋白相互作用及其功能研究的基础。
互作蛋白的筛选方法主要可分为体外(in vitro)和体内(in vivo)筛选,体外筛选包括Pull-down和蛋白质交联(cross linking)等方法,体内筛选包括免疫共沉淀(Co-IP)、酵母杂交、生物素识别(BioID)等方法。互作蛋白的筛选首先通过Co-IP或Pull-down等体内外筛选方法捕获目标蛋白及其互作蛋白,再采用LC-MS/MS检测技术与对照组进行定性和定量对比以去除非特异性结合的背景蛋白,最终筛选出置信度较高的与目标蛋白发生相互作用的互作蛋白。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供蛋白质互作分析服务,及后续基于液质联用技术(LC-MS/MS)对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析服务。您只需告知我们您的实验目的并寄出样品,我们将负责项目后续所有事宜,包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、抗体IP、效率检测、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
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