做蛋白组分液相分析,溶剂是0.1%TFA,流动相是0.1%TFA与乙腈,但是5min内总是会出现远远高于目标峰的峰是为什么呀?
在蛋白质组学的液相色谱分析中,如果在5分钟内出现远高于目标峰的峰,这种情况有几个可能的原因:
1.系统峰或基线漂移:
在分析的初始阶段,由于流动相中的溶剂组分与色谱柱的平衡,可能会产生较大的系统峰。特别是在使用含有有机溶剂(如乙腈)和0.1%三氟乙酸(TFA)的流动相时,这种现象更为常见。
2.样品中的杂质:
如果样品处理不当,可能含有杂质,如盐类或其他小分子,这些杂质会在分析的早期阶段首先被洗脱出来,形成较大的峰。
3.溶剂不匹配:
如果样品的溶解溶剂与流动相的组成不匹配,可能会在初始阶段产生溶剂效应,导致突出的峰出现。
4.溶剂和样品的注入体积:
过大的样品注入量或不适当的溶剂体积也可能导致初始峰的出现。
5.色谱柱平衡不充分:
在分析之前,如果色谱柱没有充分平衡至稳定状态,也可能出现异常峰。
如果用有机系滤膜过滤样品之后溶剂峰会明显降低,说明样品中的含有大量的杂质,此时可以对样品进行净化,确保样品中不含高浓度的盐或其他小分子杂质。
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