多糖的分析方法和过程:请问多糖分子量测定必须要经过纯化吗?
多糖分子量测定不一定需要经过纯化,但纯化可以显著提高测定结果的准确性和可靠性。多糖样品中的杂质,如蛋白质、其他多糖、盐和小分子物质等,可能会干扰分子量测定,导致结果偏差。然而,纯化步骤也不是绝对必要的,因为在某些情况下,使用特定技术可以在未纯化的样品中进行分子量测定。以下是几种常用的多糖分子量测定方法,以及它们对纯化的要求:
1.凝胶渗透色谱法(GPC)或高效液相色谱法(HPLC):
这些方法在多糖纯化后的情况下效果最好。但是,通过使用一些特殊的色谱填料和缓冲液,可以在一定程度上减轻纯化的要求。
2.电喷雾质谱法(ESI-MS):
这种方法对样品纯度要求较高,因为杂质可能影响质谱信号的准确性。
3.静态光散射法(SLS):
这种方法对样品的纯度要求较高,因为杂质可能影响散射光强度的测量。因此,建议对样品进行纯化。
4.原子力显微镜法(AFM):
这种方法可以在未纯化的样品中进行分子量测定,但需要确保样品在显微镜载玻片上的分布适当。
多糖分子量测定是否需要纯化取决于所使用的方法和实际应用的需求。在某些情况下,可以使用特定技术进行未纯化样品的分子量测定,但纯化程度较高的多糖样品有助于准确测定分子量。
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