怎样从多种蛋白质中分离、纯化并鉴定相对子质量在100KD的目的蛋白质A?

    要从多种蛋白质中分离、纯化并鉴定相对分子质量在100 kDa的目的蛋白质A,可以采用以下步骤:


    1.初步分离:

    首先,使用盐析法、溶剂沉淀法或pH沉淀法等方法,对蛋白质混合物进行初步分离,去除一部分不需要的蛋白质。


    2.蛋白质纯化:

    根据目的蛋白质的特性(如亲水性、电荷、特异性亲和性等),选择合适的色谱方法进行纯化。常见的方法包括亲和色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱等。

    • 如果目的蛋白质A已知,并且有特异的抗体或者它含有一种可以识别的标签(例如His-tag),可以使用亲和色谱方法进行纯化。
    • 如果知道蛋白质A的等电点和其他蛋白质有显著的差异,可以使用离子交换色谱。
    • 如果蛋白质A的大小与其他蛋白质显著不同,可以使用凝胶过滤色谱。

    4.SDS-PAGE 验证:

    纯化后,可以使用SDS-PAGE电泳来检查纯化的效果。SDS-PAGE可以根据蛋白质的大小对蛋白质进行分离。蛋白质A应该在相对分子质量大约为100kDa的位置出现。


    5.蛋白质鉴定:

    如果有蛋白质A的特异抗体,可以通过Western blot进行验证。另外,也可以通过质谱技术鉴定蛋白质的种类,这需要将蛋白质切割成肽段,然后通过质谱图谱匹配已知的蛋白质数据库进行精确的分子量鉴定。


    百泰派克生物科技--生物药物表征,多组学生物质谱检测优质服务商


    相关服务:

    分子量测定

    蛋白分子量测定

    蛋白质复合物,蛋白质与小分子复合物分子量测定

    高分辨质谱分子量鉴定

    MALDI TOF分子量分析

    1D SDS-PAGE和IEF服务

    2D Blue Native/SDS-PAGE复合物分析服务

    SDS-PAGE蛋白质纯度分析

    蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)

    蛋白质纯度和均一性表征

    蛋白质质谱鉴定

    蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

    二维凝胶电泳服务

提交需求
姓名 *
联系类型 *
联系方式 *
项目描述
咨询项目 *

 

How to order?


/assets/images/icon/icon-rc2.png

客服咨询

/assets/images/icon/icon-message.png

提交需求

https://file.biotech-pack.com/static/btpk/assets/images/icon/icon-wx-2.png

https://file.biotech-pack.com/pro/bt-btpk/image/head/config/20240104-5618-企业微信销售二维码.jpg

联系销售人员

/assets/images/icon/icon-tag-sale.png

促销活动

/assets/images/icon/icon-return.png