看蛋白修饰算CO-IP吗?需要用triton100吗?
CO-IP (Co-immunoprecipitation)是一种常用的蛋白质相互作用研究技术,通过特异性抗体识别目标蛋白并将其与相互作用蛋白共同沉淀下来,从而研究它们之间的相互作用关系。CO-IP并不是一种特定的蛋白修饰分析方法,而是一种用于分析蛋白质相互作用的实验方法。
如果您想要分析特定蛋白修饰的水平,可以使用其他定量蛋白质组学技术,例如Western blot、MS等。当然,如果您已经使用CO-IP技术成功地免疫共沉淀了目标蛋白质和修饰酶等,可以将共沉淀物进行Western blot分析,以确定目标蛋白质的修饰水平。
一般情况下,CO-IP实验需要使用一些辅助试剂来破坏细胞膜和胞核膜等细胞结构,以便充分释放目标蛋白和相互作用蛋白。Triton X-100是一种非离子型表面活性剂,可以破坏细胞膜和胞核膜,有利于蛋白质的释放。因此,在CO-IP实验中,使用Triton X-100或其他表面活性剂的加入可以帮助释放更多的目标蛋白和相互作用蛋白,提高实验的灵敏度和特异性。
需要注意的是,Triton X-100或其他表面活性剂的加入可能会对某些蛋白质的性质产生影响,例如会导致一些蛋白质的凝聚或聚集,或者改变蛋白质的构象等。因此,在实验设计和操作过程中需要考虑样品的特性和目的,并根据需要进行优化和调整。
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