现在的牦牛乳低聚糖的表征技术用的是什么方法呢?

    牛乳低聚糖,尤其是牦牛乳低聚糖,目前主要通过结合色谱与质谱技术进行结构鉴定与定量分析,具体方法包括以下几类:

     

    1、样品提取与纯化

    通过蛋白沉淀、脂肪去除后,使用固相萃取(SPE)等方法分离乳糖、低聚糖及其他成分,为后续分析清洗背景干扰。

     

    2、液相色谱–电喷雾–串联质谱(LC‑ESI‑MS/MS)

    (1)常用于定性/定量分析自由与共轭低聚糖,例如同时检测中性与唾液酸型糖甙。

    (2)通过高效液相色谱(如反相或石墨炭色谱 PGC)结合 ESI‑MS/MS 获取母离子和断裂谱片段,实现结构推断与异构体分辨。

    (3)对糖链进行过碳基化(permethylation)处理,有助提升 MS/MS 断裂清晰度与信号强度,提高结构解析能力。

     

    3、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI‑TOF‑MS)

    (1)用于快速直观地分析低聚糖群体特征(m/z 分布),尤其对唾液酸和中性低聚糖有较好覆盖。

    (2)常结合高效液相或前端分馏,提高成分清晰度,甄别新型结构。

     

    4、核磁共振谱(NMR)——¹H/¹³C 和 2D 实验

    在纯化程度足够(≥10 mg)情况下,通过 1D/2D NMR(COSY、HSQC、HMBC、TOCSY 等)系统获得糖序列、苷键位置、立构配置等详细结构信息,是必不可少的确认手段。

     

    5、辅助分析方法

    (1)对挥发性或风味类成分,可用 HS‑SPME‑GC‑MS;但主要用于香气成分,不用于低聚糖结构定性。

    (2)多重反应监测(MRM)模式下的三重四极杆质谱可用于高灵敏、多靶标定量应用,适合复杂糖组合物的深入定量。

     

    综合推荐策略

    标准流程建议如下:

    1、提取–净化: 去脂去蛋白→SPE分馏自由/结合低聚糖;

    2、LC‑ESI‑MS/MS(含过碳基化处理): 高效定性与精确定量;

    3、MALDI‑TOF‑MS: 快速群体分析与谱群判断;

    4、NMR(必要时): 确认关键结构信息;

    5、MRM-MS(可选): 大批量样本定量分析。

     

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    相关服务:

    糖类及糖代谢

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