前后两次纯化出蛋白的分子量略有差别是什么原因
当在前后两次纯化过程中得到的蛋白分子量出现略有差别时,可能的原因有:
1.蛋白降解:
长时间或不适当的储存、处理条件可能导致蛋白部分降解,从而导致测得的分子量减小。
2.实验条件:
轻微的实验条件变化,例如pH、盐度、洗脱缓冲液的组成、温度等,都可能影响蛋白质的结构和随后的迁移行为,例如电泳缓冲液的制备、样品的处理、凝胶的选择等,可能导致蛋白在电泳时的迁移性发生变化。
如果你是通过SDS-PAGE来确定蛋白质的分子量,需要注意的是凝胶的浓度、孔隙大小、SDS的浓度、甚至电流的强度和电泳时间都可能影响蛋白质的迁移率。
3.样本加载量和纯度:
不同的样本纯度和浓度可能会影响SDS-PAGE结果,因为过度加载的蛋白质可能会导致迁移异常。
5.设备误差:
使用的仪器可能存在校准不准确或其他误差,从而导致测定结果出现偏差。
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