请问非变性凝胶电泳可以使互作蛋白复合物分开吗?比如复合物AB跑完胶以后,出现其中一个蛋白A的条带?
非变性凝胶电泳并非旨在分离互作蛋白复合物,但在某些特定条件下,仍有可能实现复合物AB的分离。
非变性凝胶电泳的主要原理是蛋白质在电场中随电荷和大小而分离。复合物是否能够在非变性凝胶电泳中分离取决于一些因素,如蛋白质间的相互作用强度、复合物的稳定性、蛋白质分子的大小与电荷等。如果蛋白质间的相互作用较弱,电泳过程可能导致复合物破裂,并在胶上形成单个蛋白质的条带。然而,如果相互作用较强,则复合物在胶上可能保持结合,不能分离。
如果你的目标是破坏复合物,并在凝胶上观察到每个单独的蛋白质,更适合采用变性凝胶电泳(如SDS-PAGE)。在这种方法中,蛋白质与SDS及其他变性剂结合,使复合物破裂同时阻止其重新结合,如此一来蛋白质在胶上分离成各自的条带。您还可以尝试使用更弱的分离条件(如减少电泳时间、改变缓冲体系等),从而提高非变性凝胶电泳中蛋白质复合物的分离效果。
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