细胞膜蛋白co-ip

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话，那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时，另一个蛋白也会被同时沉淀下来。

Co-IP是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法，细胞膜蛋白Co-IP可用于验证细胞膜蛋白之间或者膜蛋白与其他蛋白的相互作用。

在膜蛋白Co-IP实验过程中，首先需要根据细胞膜提取原理从细胞裂解液中提取细胞膜，细胞膜提取的原理为：将细胞暴露于阳离子硅胶珠（直径20-50nm），带正电荷的硅胶珠包被并粘附在细胞表面，然后被包被的细胞由带负电荷的聚丙烯酸（PAA）过度包被。硅胶珠包被的细胞膜比其他细胞器密度要大，可以通过梯度离心被分离。

从细胞膜中提取膜受体蛋白：在2%SDS溶液中煮沸硅胶包被的细胞膜5min以溶解膜蛋白，分离提取溶解的细胞膜蛋白。分离纯化并富集足够多的样品，之后可采用Co-IP实验来进行细胞膜蛋白之间或者膜蛋白与其他蛋白的相互作用。

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