免疫沉淀与Pull-down实验

    免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是一种基于抗体和抗原特异性结合的原理开发的用来检测、分离、纯化蛋白质以及研究蛋白互作的方法。免疫沉淀技术提供结合抗体蛋白的磁珠,将细胞裂解液或组织提取液等蛋白混合体系与磁珠进行孵化,此时,混合体系中的目标蛋白与磁珠上的抗体蛋白实现特异性结合,再通过离心或洗脱去掉没有与抗体蛋白结合的杂蛋白,将目标蛋白分离出来,通过与其他技术(如质谱)结合可以鉴定目标蛋白的种类、分析蛋白相互作用。

    Pull down实验又称拉下实验,是一种体外亲和纯化技术,蛋白Pull down技术可以提供一种诱饵蛋白来特异性识别配体蛋白质,以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的,是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。诱饵蛋白的实质是被亲和试剂标签(如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素)标记的已知蛋白。现又衍生了一种DNA pull down技术,用来研究DNA与蛋白质的互作。蛋白Pull-down可用于证实已知的蛋白或肽的相互作用,也可以用来发掘未知的蛋白或肽的相互作用。

    综上,免疫沉淀和Pull down实验都可以用于分离、富集、纯化蛋白质以及研究蛋白质相互作用,只是二者的原理存在差异。

    百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台结合Nano-LC纳升色谱,为广大科研工作者提供基于Pull down和免疫沉淀的蛋白质相互作用分析一站式技术服务,以及后续基于液质联用技术(LC-MS/MS)对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析服务。欢迎免费咨询:15201377680(微信同号)。

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