蛋白质谱几种方法比较

    质谱技术将样品分子电离成离子,通过检测离子的质荷比等质谱信息实现样品的定性和定量等鉴定,是蛋白质组学研究的重要工具,不仅可以鉴定蛋白质的分子质量、含量和氨基酸序列,还可以检测蛋白质翻译后修饰情况。在分析蛋白质的分子质量或氨基酸序列时进行单级质谱就足够了;若要对蛋白质翻译后修饰情况进行表征,则还需要选择特殊离子通过碰撞池进行裂解分析,即串联质谱分析。质谱仪主要由离子源、质量分析器和离子检测器3个核心部分组成。离子源的作用是将样品分子电离成离子,质量分析器根据离子的质荷比不同来分离离子,然后利用离子检测器进行检测。随着生命科学技术的发展,目前已涌现了多种不同的质谱电离技术和质量分析器,它们在物理原理、性能参数、操作模式以及适用性等方面都各具特色。

    1. 1.不同电离方式比较:
    电离方式 检测化合物类型 进样形式 主要特点
    电子轰击电离(EI) 小分子、低极性、易挥发 GC或液体/固体
    吸附于探针
    硬电离,重现性高,结构信息多
    化学电离(CI) 小分子、中低极性、易挥发 GC或液体/固体
    吸附于探针
    软电离,提供分子离子信息
    电喷雾电离(ESI) 小分子、蛋白质、多肽、非易挥发 液相色谱或直接注射样品溶液 软电离,多电荷离子
    快原子轰击电离(FAB) 碳水化合物、有机金属化合物、蛋白质、非挥发性 样本溶于粘稠基质中 软电离,比ESI和MALDI硬
    基质辅助激光解吸电离(MALDI) 多肽、蛋白质、核酸 样本与固体基质混合 软电离,适合高分子化合物

    二、不同质量分析器比较

    类型 测定参数 质量范围 分辨率 特点
    四级杆 质量/电荷 m/z3000 2000 适合电喷雾,易于正负离子模式切换,体积小,价格低
    离子阱 频率 m/z2000 1500 体积小,中等分辨率,设计简单,价格低,适合多级质谱,易于正负离子模式切换
    磁场 运动/电荷 m/z2000 10000 分辨率高,分子量测试准确,中等测试范围
    飞行时间 飞行时间 m/z∞ 15000 质量范围宽,扫描速度快,设计简单
    傅立叶变换离子回旋共振 频率 m/z10000 30000 高分辨率,适合多级质谱,需要高真空和超导磁体

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    相关服务:
    蛋白质质谱鉴定
    分子量测定
    蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
    肽质量指纹图谱分析服务
    膜蛋白鉴定服务
    蛋白质质谱鉴定
    Shotgun鸟枪法蛋白质鉴定
    Pull-down靶蛋白质谱鉴定
    蛋白质结构鉴定
    蛋白质一级结构的测定
    多肽质谱鉴定
    肽段覆盖率/肽谱图分析
    蛋白质肽谱图测定
    基于质谱的序列分析

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