蛋白质二级结构测定

二级结构是蛋白质结构的重要组成部分，对于理解蛋白质的功能和稳定性至关重要。其测定技术包括X射线晶体学、核磁共振（NMR）和圆二色谱（CD）等。这里主要介绍圆二色谱(Circular Dichroism，CD)技术。

 

一、工作原理

1.蛋白质中的肽键是平面的，并具有部分双键性质，因此能吸收紫外光的特定波长并发生旋光现象。不同的二级结构对紫外光的吸收和旋光现象有不同的特征。

 

2.CD光谱仪通过测量样品对左旋光和右旋光的吸收差距，从而获得了蛋白质的二级结构信息。

 

二、获取光谱

样品需为溶液状态，浓度通常在0.1-1mg/ml之间。样品应无色并避免含有能吸收紫外光的杂质。

 

三、解析光谱

1.获得的CD光谱将显示波长（通常在190-250nm）与旋光度之间的关系。不同的二级结构在特定波长上有特定的旋光度。

 

2.通过软件分析，可以得到蛋白质的二级结构成分比例。

 

四、应用

1.鉴定蛋白质二级结构

通过CD光谱，可以了解蛋白质的α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲等二级结构的比例。

 

2.研究蛋白质折叠

通过测量不同时间点的CD光谱，可以了解蛋白质折叠的动态过程。

 

3.研究蛋白质稳定性

通过测量不同温度下的CD光谱，可以了解蛋白质的热稳定性。

 

五、优势

1.快速

大多数CD分析只需几分钟。

 

2.无损

样品在测量后可回收。

 

3.灵敏度和分辨率

CD可以区分不同的蛋白质二级结构，并可以对低至微摩尔级别的样品进行分析。

 

百泰派克生物科技——生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商

 

相关服务： 

红外光谱分析（FT-IR）

蛋白质结构鉴定

蛋白质二级结构分析

蛋白质圆二色谱分析