蛋白质的检测原理及步骤
蛋白质是生命体内的主要工作分子,它们负责几乎所有生命过程。因此,测定生物样品中的蛋白质含量是科研实验中最基本也是最重要的步骤之一。
常用的蛋白质检测方法有以下几种:
1.吸光光度法
依据蛋白质能吸收特定波长光的特性进行测定。常用的有紫外吸收法和比氏蛋白定量法。
2.比色法
蛋白质与比色试剂反应产生有色物质,通过测定其光吸收值来定量蛋白质。常用的有布拉德福蛋白定量法、Lowry法等。
3.荧光法
利用蛋白质的荧光性或特定荧光染料与蛋白质结合后产生荧光的特性来定量蛋白质。例如,用荧光素异硫氰酸酯标记蛋白质,然后通过荧光光度计检测其荧光强度来量定蛋白质。
以下简单介绍布拉德福蛋白定量法的基本步骤:
1.样品的准备
收集含有蛋白质的生物样品,并进行适当的处理。
2.比色反应
将布拉德福试剂加入到样品中,使其与蛋白质发生反应生成有色物质。通常此过程需要进行一定时间的孵育。
3.光度测定
用分光光度计测定样品在595 nm处的吸光度。
4.蛋白质的定量
通过对不同浓度的蛋白质标准品进行同样的处理和测定,得到一个吸光度与蛋白质浓度之间的标准曲线。然后,通过检测样品的吸光度,可以从标准曲线中得到样品的蛋白质浓度.
蛋白质的检测需要结合多种方法和手段,才能准确、全面地了解样品中的蛋白质含量和性质。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
相关服务:
How to order?