如何进行非靶向代谢组学？
-
VIP（Variable Importance in Projection）值 > 1
-
P值 < 0.05
-
Fold change（FC） > 1.5 或 < 0.67
-
精确质量数（m/z）
-
同位素分布
-
MS/MS碎片谱匹配
-
数据库比对：HMDB, METLIN, MassBank, KEGG 等
-
通路富集分析（Metabolic Pathway Enrichment）：如KEGG、Reactome
-
代谢网络重建：结合转录组/蛋白组信息，构建多组学互作图谱
非靶向代谢组学是在不预先设定目标化合物的前提下，通过高分辨质谱（如 LC-MS/MS 或 GC-MS）分析生物样本中上千种代谢物，以捕捉在疾病、环境变化或药物干预等条件下的代谢扰动。非靶向代谢组学（Untargeted Metabolomics）是一种系统地分析生物样本中尽可能多代谢物的小分子组学方法。其目标是不带偏见地捕捉样本中的广泛代谢变化，从而揭示潜在的生物标志物、生理状态或代谢通路扰动。相比于靶向方法，非靶向代谢组学覆盖面更广，适合新型机制研究与假设生成。
一、如何进行非靶向代谢组学？
非靶向代谢组学通常包括以下五个关键步骤：
1、样本采集与预处理
样本类型可以是血浆、尿液、组织、细胞、甚至粪便。此阶段的关键是最大限度保留代谢物原貌，防止降解或人为偏倚。
（1）前处理方法：蛋白沉淀（甲醇、乙腈）、液液萃取、固相萃取等。
（2）注意事项：避免反复冻融，采样时间点要一致，操作标准化。
2、色谱-质谱平台检测
非靶向代谢组学常用以下几种质谱平台：
（1）LC-MS（液相色谱-质谱联用）：适用于中性、极性代谢物，如有机酸、氨基酸等；
（2）GC-MS（气相色谱-质谱联用）：用于挥发性或需衍生化的小分子，如脂肪酸、糖类等；
（3）CE-MS（毛细管电泳-质谱）：分析带电小分子；
（4）HRMS（高分辨质谱）：如Orbitrap、TOF，便于代谢物结构推断与定性。
3、数据预处理
原始质谱数据需经过严格的预处理步骤，包括：
（1）峰提取（Peak Picking）；
（2）峰对齐（Alignment）；
（3）去噪与缺失值填补；
（4）信号归一化。
此阶段直接决定下游统计分析的可信度。
4、多变量统计分析与差异代谢物筛选
非靶向代谢组学强调模式识别和群体区分，常用方法包括：
（1）主成分分析（PCA）：无监督方法，观察样本间整体分布
（2）偏最小二乘判别分析（PLS-DA）：有监督方法，用于挖掘组间差异
（3）差异代谢物筛选标准：
5、代谢物鉴定与通路富集分析
（1）代谢物鉴定是非靶向代谢组学的最大挑战之一，通常基于：
（2）接着可进行：
二、非靶向代谢组学的常见难点与优化建议
三、百泰派克生物科技：高标准非靶向代谢组学服务平台
作为生命科学多组学服务提供商，百泰派克生物科技在非靶向代谢组学方面拥有以下优势：
1、质谱平台先进：搭载Thermo Orbitrap Exploris 240，覆盖更广代谢物谱系；
2、标准化流程：从样本处理到数据分析，严格质控；
3、定制化服务：可结合蛋白组、转录组开展多组学整合；
4、科研合作经验丰富：已服务超过300家高校及生物医药企业。
非靶向代谢组学能从全局角度揭示生物过程中的代谢变化。成功实施该技术不仅依赖先进的质谱平台，更需要标准化的操作流程与专业的数据分析能力。若您计划开展非靶向代谢组学研究，欢迎咨询百泰派克生物科技，我们将为您的科研项目提供全流程、一站式技术支持。
How to order?
