哪些技术最适合空间蛋白组学数据采集?
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原理:采用抗体标签编码策略,通过多轮荧光成像检测上百种蛋白。
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优势:高通量(可检测50+蛋白)、空间分辨率高(细胞级),适用于组织切片。
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局限:依赖高质量抗体,通量受限于光学系统和轮次识别效率。
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原理:使用金属标记抗体,通过二次离子质谱(SIMS)成像检测蛋白分布。
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优势:蛋白标记种类多(可检测40+)、无荧光串扰、背景低。
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局限:仪器昂贵、成像速度较慢,适合高分辨率需求的组织病理研究。
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原理:结合CyTOF和激光消融,将金属标记抗体的空间信号转化为质谱信号。
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优势:通量高、抗体串扰低、适合病理组织空间蛋白谱绘制。
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应用场景:肿瘤微环境、免疫细胞浸润等空间研究。
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原理:使用激光微切系统将组织中特定区域切割下来,进行蛋白提取和质谱分析。
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优势:空间解析度高(可达单细胞)、蛋白鉴定深度高。
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挑战:样本制备繁琐,操作复杂,适合针对特定微区深入研究。
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原理:将样本上涂布基质后进行逐点激光扫描,结合TOF质谱分析蛋白分布。
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优势:无需抗体标记,空间分辨率高(~10μm),蛋白与代谢物均可检测。
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不足:蛋白种类受限,主要用于质谱成像展示而非深度鉴定。
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原理:结合TMT标记、纳升级LC-MS/MS等手段,实现单细胞级别的蛋白组分析。
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优势:高灵敏度、定量准确,适用于单细胞空间定位后分析。
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局限:仍需结合空间定位手段,如显微定位或空间条码。
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Visium + 质谱:10x Genomics Visium用于空间RNA定位,后续区域蛋白质分析结合LC-MS。
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DSP(Digital Spatial Profiling):NanoString平台,可实现蛋白和RNA的空间共定位检测。
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优化低样本量蛋白提取策略
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建立高灵敏度LC-MS/MS方法
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提供个性化抗体筛选与标记服务(用于标记引导的空间区域采集)
空间蛋白组学(Spatial Proteomics)是近年来生命科学领域的前沿热点之一,其目标是在组织或细胞微环境中解析蛋白质的空间分布及其动态变化。为了实现这一目标,数据采集技术必须兼具高空间分辨率、蛋白检测通量和定量准确性。目前,主流的空间蛋白组学数据采集技术大致可以分为两大类:基于成像的技术与基于质谱的技术,它们各有优势,适用于不同的研究场景。
一、基于成像的空间蛋白组学技术
这类技术通常通过抗体、探针等手段对蛋白进行标记,然后借助成像设备进行空间定位和定量。
1、CODEX(CO-Detection by Indexing)
2、MIBI(Multiplexed Ion Beam Imaging)
3、Imaging Mass Cytometry(IMC)
二、基于质谱的空间蛋白组学技术
这类方法通过原位消化和激光微切或空间编码等方式,将组织样本按空间位置信息进行分区,结合质谱分析获取蛋白组数据。
1、LCM-MS(Laser Capture Microdissection + MS)
2、MALDI Imaging(基质辅助激光解析电离成像)
3、SCoPE2(Single-Cell Proteomics by Mass Spectrometry)
三、融合技术的趋势:空间蛋白组学 × 多组学整合
目前,空间蛋白组学正逐渐向空间多组学方向拓展,与空间转录组、代谢组技术相结合,例如:
四、百泰派克生物科技在空间蛋白组学中的技术优势
在百泰派克生物科技,我们结合先进的激光微切系统(LCM)与高分辨质谱平台(如Orbitrap Exploris系列),构建了适用于FFPE和新鲜组织切片的空间蛋白组分析流程。并通过:
使得客户在空间研究中既可获得高空间分辨率,又能实现深度蛋白组定量,适用于肿瘤微环境、组织异质性、神经发育等研究方向。
五、总结:不同研究需求对应不同技术路径
| 技术名称 | 分辨率 | 检测通量 | 是否需抗体 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|
| CODEX | 单细胞级 | 高 | 是 | 组织切片、免疫研究 |
| IMC | 单细胞级 | 高 | 是 | 肿瘤微环境、免疫浸润 |
| LCM-MS | 微区/单细胞 | 中-高 | 否 | 病理区域分析 |
| MALDI | 10~50μm | 中 | 否 | 药物分布、代谢分析 |
| SCoPE2 | 单细胞 | 高 | 否 | 单细胞研究 |
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