远紫外圆二色性（CD）光谱分析
-
非破坏性检测：不需对样品做复杂标记或变性处理，保持生理条件下的蛋白原构象；
-
低样品消耗：微量蛋白样本即可完成检测，适配早期开发阶段的小规模实验；
-
快速高通量：扫描速度快，适用于多样品平行分析；
-
结构特异性强：可清晰区分不同二级结构特征光谱，便于结构变化监测。
-
分辨率较低：无法提供原子级别的结构信息；
-
对缓冲液条件敏感：高浓度盐离子、强吸光试剂（如DTT、Tris）可能干扰远紫外测定；
-
数据解读依赖模型库：需使用高质量的标准数据库进行拟合，结果依赖参考样本的代表性。
在结构生物学研究中，精准获取蛋白质的二级结构信息对理解其功能至关重要。远紫外圆二色性（Far-UV Circular Dichroism, CD）光谱技术，作为一种高灵敏、非破坏性的分析手段，广泛应用于蛋白质构象研究、结构稳定性评价以及药物-蛋白相互作用分析等多个领域。
一、什么是远紫外圆二色性（CD）光谱？
圆二色性（CD）指的是手性分子在圆偏振光左旋和右旋之间吸收差异所产生的光谱信号。远紫外CD分析通常聚焦于190–250 nm波长范围，此区域能反映肽键对紫外光的吸收特性，因此特别适用于解析蛋白质的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲等二级结构组成。在CD光谱中，不同类型的二级结构具有特征性峰值。例如，α-螺旋结构通常在208 nm 和222 nm处呈现负峰，而β-折叠则在218 nm附近产生负峰。这些光谱差异为快速估算蛋白质构象提供了依据。
二、远紫外CD的主要应用场景
1、蛋白质构象研究与二级结构定量分析
远紫外CD是蛋白结构初步表征的重要手段，尤其适用于重组蛋白表达与纯化后的快速质量控制。借助光谱拟合软件，可对样品中α-螺旋、β-折叠及无规结构的相对比例进行半定量分析，为后续的高级结构研究提供基础。
2、蛋白质稳定性与变性过程监测
通过温度梯度（热熔解曲线）或pH梯度条件下的CD测量，可实时追踪蛋白质二级结构的变化过程，绘制变性曲线，进而评估蛋白质的热稳定性或缓冲体系对构象的影响。这一能力在疫苗设计、蛋白药物开发中尤为关键。
3、蛋白-配体相互作用检测
远紫外CD光谱能够检测蛋白质与小分子、核酸、金属离子等结合后所引起的构象变化。相较于传统的荧光法或ITC等技术，CD提供的是关于整体结构构象变化的信息，适用于初步筛选结合事件及其结构学后果。
三、技术优势与局限性
1、优势
2、局限性
四、远紫外CD与其他结构分析方法的互补性
尽管远紫外CD无法提供蛋白的三维结构，但其操作便捷、灵敏度高的特点，使其成为X射线晶体学、冷冻电镜、NMR等高分辨率技术的重要补充。在蛋白质工程、突变体筛选或构象稳定性优化等场景中，CD常用于前期快速筛选与构象趋势判断，从而指导更深入的结构研究。
远紫外圆二色性（CD）光谱分析以其高效、简便和信息丰富的特点，正在成为蛋白质结构初筛的重要工具。随着生物药物研发与分子机制研究的不断深入，CD技术将在更多科研与产业应用中发挥关键价值。百泰派克生物科技依托先进的光谱平台与严格的标准化操作流程，提供高质量的蛋白质圆二色谱分析服务。欢迎联系我们获取专属解决方案！
百泰派克生物科技——生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商
相关服务：
How to order?
