液质联用检测磷酸化位点

过去确定磷酸化位点最常用的是逐步化学降解法，如丝氨酸和苏氨酸磷酸化分析方法、酪氨酸磷酸化分析方法。随着生命科学技术的发展，化学方法已经被质谱法所取代，目前可通过液质联用（LC-MS）检测磷酸化位点。

液质联用一般是由前端液相色谱+质谱仪组成，液相色谱为分离系统，质谱为检测系统，样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。复杂的蛋白混合物中大规模的磷酸化蛋白分析包括磷酸化蛋白/磷酸化肽段的鉴定，以及磷酸化残基的测序和磷酸化位点鉴定，均可通过液质联用方法检测。

液质联用检测分析是鉴定特异性磷酸化蛋白/多肽以及对特异性磷酸化残基进行定位的有用工具，其具有高灵敏度和高分辨率，可以识别单个蛋白质或者多肽。尽管磷酸化多肽的信号通常比非磷酸化多肽的信号弱，但是最新的技术已经可以使质谱信号富集，包括固定化金属亲和层析、磷酸特异性抗体富集、化学修饰方法和用生物素部份置换磷酸基团。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，Orbitrap Fusion质谱平台，Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，推出磷酸化定量蛋白组分析服务技术包裹。只需要将您的实验目的告诉我们并寄送样品，百泰派克生物科技负责项目后续，包括蛋白提取、蛋白酶切、磷酸化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析所有事宜。