蛋白磷酸化检测最新方法
蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP或GTP的γ位的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸)上的过程,而其逆向过程则是由蛋白质磷酸酶去除相应的磷酸基团。对蛋白磷酸化进行检测与表征,可更好的了解磷酸化过程及其涉及到的生理活动调控及功能。
在进行蛋白磷酸化检测时,选择的方法可能会因具体样本、实验室仪器等因素而有所不同。常用的磷酸化检测方法包括32P同位素放射性标记法、酶联免疫吸附分析(ELISA)、Phos-tag gel电泳-免疫印迹结合法、Western blot蛋白免疫印迹法以及高通量质谱法等。质谱法作为一种最新的磷酸化检测方法基于其高通量、高分辨率以及高准确度的优点已被广大研究者普遍应用。基于质谱的蛋白磷酸化分析可用于识别磷酸化多肽的存在、根据氨基酸序列确定磷酸化类型、确定磷酸化位点,并在能够识别磷酸化蛋白质的生物环境下,实时定量确定蛋白磷酸化位点。此外,质谱技术还广泛运用于蛋白质的定性(包括分子结构、分子量、肽链氨基酸排序以及多肽或二硫键数目及其位置鉴定)和定量鉴定。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出磷酸化定量蛋白组分析服务技术包裹。只需要将您的实验目的告诉我们并寄送样品,百泰派克生物科技负责项目后续,包括蛋白提取、蛋白酶切、磷酸化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析所有事宜。
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