泛素化蛋白质鉴定

蛋白泛素化定义

蛋白泛素化是一种重要的蛋白质翻译后修饰形式，常发生在真核生物体内。在ATP供能的条件下，一系列泛素化酶将小分子多肽-泛素通过三个级联反应与目标蛋白质或底物蛋白质的赖氨酸残基发生共价结合，根据蛋白质连接的泛素分子的多少以及方式，可以将泛素化分为单泛素化、多聚泛素化和线形多聚泛素化。

泛素化修饰在生命活动方面具有重要的调控作用，主要介导蛋白质发生降解，此外，还参与细胞的生长、分化、凋亡、转录激活、基因沉默、免疫应答等生命过程。

泛素化蛋白质鉴定方法

泛素化蛋白质鉴定的内容包括样品蛋白质是否发生泛素化、发生何种泛素化以及有多少蛋白质发生泛素化。目前，检测蛋白泛素化的方法主要有基于特异抗体的方法和基于质谱的鉴定方法。

基于特异抗体的方法如染色质免疫共沉淀、Western免疫印迹等，其基本原理相似，都是将样品蛋白进行提取、纯化、分离，再与抗体进行特异性结合并进行显色拍照，最后分析蛋白质泛素化的情况。

由于正常生理状态下蛋白质泛素化的程度较低，在利用质谱方法进行鉴定前，通常要将样品蛋白进行酶解，再用特异性识别抗体对泛素化的蛋白进行富集，然后进行质谱分析，最后对质谱数据进行数据库比对分析和生物信息学分析来定性和定量鉴定蛋白泛素化。

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