质谱分析蛋白质修饰泛素化

泛素化修饰（Ubiquitylation）是真核生物中常见的蛋白质翻译后修饰方式，指小分子多肽泛素在相关酶的作用下通过级联反应以共价键连接在底物蛋白或目标蛋白的氨基酸残基上的过程。

泛素化修饰质谱分析就是利用质谱技术对泛素化修饰进行鉴定，包括泛素化修饰定性鉴定、泛素化位点鉴定以及泛素化水平鉴定等。由于正常生理状态下泛素化水平较低，在进行质谱鉴定前，有必要对泛素化肽段进行分离富集，以提高泛素化肽段的丰度。利用质谱技术分析泛素化蛋白质的大致流程为先将蛋白质酶解消化为小分子肽段，通过亲和色谱等技术对泛素化肽段进行分离富集，再利用质谱仪进行串联质谱分析，检测各肽段的分子质量。与发生了泛素化修饰的肽段相比，没有发生泛素化修饰的肽段分子分子质量刚好增加了泛素分子的相对分子质量，以此作为依据可以对泛素化肽段或蛋白进行鉴定，再将初步鉴定为泛素化的肽段进行二级质谱分析，可以对其进行进一步的验证。

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