蛋白质反向色谱流动相

液相色谱法按分离的机制不同可以分为液固色谱法、液液分配色谱法、离子交换色谱法、分子排阻色谱法和亲和色谱法等。反向色谱（Reversed-phase liquid chromatography，RPLC）属于一种液液色谱技术，其流动相和固定相是两种极性相反的、互不相溶的液体。该法通过将特定的液态物质涂于担体表面或化学键合于担体表面形成液体固定相，根据被分离的组分在流动相和固定相中的溶解度不同而分离，在蛋白质和多肽等化合物的分离分析以及纯度鉴定中广泛应用。

反相色谱法的特点在于固定相的极性比流动相的弱，与之对应的正相色谱固定相的极性比流动相的强。RPLC使用非极性物质作为固定相，如C₁₈、C₈等；流动相为极性的水或缓冲液，为了调节样品物质的保留时间、控制样品在分析过程中的解离等，常常在流动相中加入甲醇、乙腈、丙酮、异丙醇、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂。

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