蛋白质酰化怎么检测

蛋白质酰化即蛋白质乙酰化，是真核生物中重要的、常见的蛋白质翻译后修饰方式之一，指在乙酰基转移酶的作用下，蛋白质N末端或赖氨酸残基共价结合乙酰辅酶A的乙酰基的过程。乙酰化修饰通过一定程度上改变原蛋白质的结构进一步影响其生物学功能，参与调控众多生命活动：如DNA复制、基因表达、转录以及蛋白合成、稳定性、亚细胞定位和降解等。研究表明乙酰化蛋白质及其调控酶与机体衰老和一些重大疾病如癌变和神经系统紊乱等也具有紧密的联系，因此研究蛋白质乙酰化对揭示生命活动的分子机理和疾病的发病机理具有特殊意义。

蛋白质乙酰化检测的目的就是鉴定蛋白质是否发生乙酰化、在何种氨基酸位点发生乙酰化以及乙酰化修饰的水平。目前常用的蛋白质乙酰化修饰检测方法主要有基于免疫印迹（WB）和基于质谱（MS）的分析手段。WB可以实现乙酰化蛋白的定性和定量鉴定，MS实现不仅可以对乙酰化蛋白进行定性和定量鉴定，还可以确定乙酰化的氨基酸位点，且灵敏度和精确度都高于WB。WB基于抗原抗体特异性结合的原理先将蛋白样品进行聚丙烯电泳分离，然后将分离产物转移到固相载体上与抗体（一抗）结合，再将其与特殊标记的二抗进行免疫反应，通过放射自显影等方法进行检测。由于正常生理条件下乙酰化蛋白质的丰度较低，基于质谱的检测方法需要先将乙酰化蛋白进行分离富集再进行质谱分析，然后将质谱数据进行生物信息学分析对乙酰化蛋白进行鉴定。

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