蛋白分析FAQ汇总

• • 体外戊二醛交联，为什么交联之后sds-page的条带脱尾严重，几乎没有主条带呢？该如何改进呀？

  在体外实验中使用戊二醛进行蛋白质的交联反应时，SDS-PAGE分析中经常会观察到条带脱尾和缺乏明显主条带的现象。这种情况可能由多种因素导致。以下是问题的可能原因以及改进建议：

• • 蛋白质加了loadingbuffer煮样跑page会因为高温变性导致蛋白降解吗？

  在SDS-PAGE实验中，蛋白加了Loading Buffer并经过高温变性，主要目的是使蛋白质完全变性、解聚和去除二硫键，从而获得均一的电泳迁移行为。但在这个过程中，大多数蛋白不会降解，因为SDS、DTT（或β-巯基乙醇）等变性剂只会破坏蛋白的二级、三级结构，使其线性化，而不会直接降解主链

• • 请问怎么分析的混合样品的二级结构含量？

  分析混合样品的二级结构含量通常需要结合实验技术和数据分析方法。以下是常用方法说明：

• • 蛋白冻在-80怎么让它恢复活性呢？

  在实验室中，蛋白质通常会被储存在极低温度下（如-80°C）以减少降解和保持其活性。当我们需要使用这些蛋白质时，正确的解冻步骤对于其活性的恢复至关重要。以下是一些步骤和注意事项，帮助确保蛋白质在解冻后尽可能保持其原有的功能特性。

• • WB蛋白不加Loading直接放-80能保存多久呢？

  在 Western Blot (WB) 实验中，蛋白样品在不添加Loading buffer的情况下直接放入-80℃保存，其稳定性会受到以下因素的影响：

• • 如何搜索某蛋白质的同源蛋白的序列？

  在生物学研究中，寻找某一蛋白质的同源蛋白序列可以帮助我们了解蛋白质的功能、进化关系以及结构特性。以下是寻找同源蛋白序列的步骤和方法：

• • 请问使用质谱数据进行蛋白定量分析的时候，需要用abundance还是abundance normalize呀？

  在使用质谱数据进行蛋白定量分析时，选择使用 abundance 还是 abundance normalize 取决于具体的实验目的和数据特性。以下是两者的关键区别和适用情况：

• • 请问胰蛋白酶一定要用质谱级的吗？

  是否需要使用质谱级胰蛋白酶，取决于实验的具体目标和精度要求。以下是对不同情况的分析：

• • 请问多肽质谱鉴定和多肽组学有什么区别呢？

  多肽质谱鉴定和多肽组学是密切相关但在概念、研究目标和应用范围上存在显著区别的两个领域。下面我将从定义、研究目标、技术方法、数据分析和应用场景五个方面来对比它们的不同之处。

• • 请问拥有四级结构的蛋白质，它的亚基之间会有共价键存在吗？

  拥有四级结构的蛋白质是由多个亚基（每个亚基通常为独立的多肽链）通过非共价相互作用和某些特定的共价键连接而形成的三维结构。这些亚基之间的相互作用可以分为以下两种情况：