蛋白分析FAQ汇总

• • 能问一下LC-2030plus怎么使用吗，完全分不清装柱方向

  LC-2030Plus是Shimadzu公司生产的液相色谱仪。液相色谱柱的安装方向通常由柱体上的箭头指示。箭头指向的方向就是溶剂流动的方向，即从泵的出口方向流向检测器。具体的使用方法及注意事项最好是参考产品的说明书，或者联系设备制造商的技术支持，以下方法仅供参考： 1.

• • 圆二色谱怎么制样啊，我是测纳米材料与I型胶原的反应

  在对纳米材料与I型胶原进行反应的测试过程中，如果你想使用圆二色谱（circular dichroism，CD）进行分析，需要注意一些关键点以保证实验的准确性，希望以下建议可以帮助到您： 1.蛋白质与纳米材料的准备：首先，需要分别准备胶原蛋白和纳米材料的溶液。对于胶原蛋白

• • 蛋白质圆二色谱分析一般有什么分析软件吗？计算什么是什么

  蛋白质圆二色谱（CD，Circular Dichroism）分析是一种常用于研究蛋白质二级结构的方法。在进行这样的实验后，通常需要专门的分析软件来解读数据，一些常用的软件主要包括： 1.DichroWeb: 一个在线分析工具，它提供了多种算法，可以估计蛋白质的二级结构比

• • 你好，我正在做蛋白交联，想知道使用了交联剂之后样品如何处理呢？直接加入裂解液裂解吗？

  在交联法蛋白相互作用分析实验中，使用了交联剂（如甲醛）对细胞进行处理后，通常需要先停止交联反应，比如通过添加Tris缓冲液、甘氨酸或者通过快速将细胞冷却至4°C来实现。细胞交联后，可以进行冷冻保存，或者立即进行裂解。 以加入甘氨酸为例： 1.交联后加入甘氨酸（gl

• • 请问蛋白交联下一步是直接裂解细胞吗？用什么裂解液比较好呢

  蛋白交联（protein crosslinking）是在细胞生物学和分子生物学中常用的实验手段，其主要目标是稳定细胞内的蛋白质-蛋白质相互作用。一般来说，交联之后的下一步确实是裂解细胞（cell lysis）。裂解的目的是打开细胞，释放其中的蛋白质等生物大分子。 使用哪

• • 麻烦问一下有没有DSS蛋白质交联的具体步骤

  "DSS" （二磺基三氮唑基丙酸二酯，Disuccinimidyl suberate)是一种常见的化学交联剂，主要用于研究和稳定蛋白质之间的相互作用。DSS在室温下以NHS酯的形式活化，可以与蛋白质的氨基酸氨基反应生成共价键。 使用DSS进行蛋白质交联的具体步骤可能会根

• • 交联法蛋白相互作用分析：我今天试了一下，是不是跑交联之前，还要看定量呢？

  是的，在进行交联实验以研究蛋白质之间的相互作用前，确实需要先进行蛋白质的定量。这个步骤非常重要，因为交联实验的结果会受到起始蛋白质浓度的影响。 在添加交联剂之前，我们需要知道蛋白质样品的确切浓度，以便正确计算所需的交联剂量。如果蛋白质浓度过高或过低，都可能导致交联效率不佳

• • 交联法蛋白相互作用分析：做蛋白质结构解析，怎么选交联剂呢

  交联剂的选择对于蛋白质结构解析来说是非常重要的步骤。在选择交联剂时，你需要考虑以下几个因素： 1.交联剂的反应性：不同的交联剂对不同的氨基酸侧链具有不同的反应性。例如，一些交联剂主要针对含有氨基或羧基的氨基酸，而其他一些则对含有硫醇基的氨基酸有反应。 2.交联剂的

• • 2D-DIGE进行定量蛋白质组学分析，为什么实验中有Analytical Gel和Prep Gel步骤？

  差异凝胶电泳2D DIGE 进行定量蛋白质组学分析，一般从分析凝胶开始实验，原因如下： 分析凝胶检测时，一般使用大约 25 µg 样品，而制备凝胶使用大约 250 µg 每个样品。分析凝胶的总蛋白上样量约为 75 µg，而制备凝胶的总蛋白上样量约为 750 µg。由于分析凝胶含有较少的样品量

• • 用iProphet文件构建库但Skyline无法识别，是否可用Spectrast构建库再导入Spectrast可以编写的格式？

  可以将SpectraST输出的.sptxt文件与Skyline一起使用。此外，我们确实支持iProphet的结果，甚至提供了大量使用iProphet分析的数据。 相关服务: DIA定量蛋白质组学