WB跑TLR4和NF-kB这两个蛋白 条带反亮怎么办,已经降低二抗的浓度了。actin 是正常的?
这种情况可能是由于多种原因造成的:
1. 二抗过量:
如果你已经尝试降低二抗的浓度,然而问题仍然存在,你可能需要进一步降低二抗的浓度,或者尝试使用不同的二抗。
2. 一抗过量:
如果二抗的浓度已经足够低,那么可能是一抗的浓度过高。尝试降低一抗的浓度,看看是否能改善结果。
3. 孵育时间过长:
一抗和二抗的孵育时间过长可能会导致非特异性的结合,从而导致条带反亮。尝试缩短孵育时间。
4. 洗涤不充分:
在一抗和二抗孵育后,需要充分洗涤以去除未结合的抗体。如果洗涤不充分,可能会导致条带反亮。增加洗涤次数或洗涤时间可能有助于解决这个问题。
5. 蛋白过量:
如果样品中的蛋白质过量,也可能导致条带反亮。尝试减少样品的蛋白质量。
6. 阻断不充分:
如果阻断步骤不充分,可能会导致非特异性的抗体结合,从而导致条带反亮。尝试增加阻断时间或改变阻断剂。
7. 曝光时间过长:
如果使用的是化学发光检测,曝光时间过长可能会导致条带反亮。尝试缩短曝光时间。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
相关服务:
提交需求
How to order?