蛋白分析FAQ汇总

一般报告里给出的是每个蛋白质组的第一个蛋白质。如果要确认其是否是唯一被鉴定的亚型，必须检查MQ_RAW选项卡或MaxQuant“蛋白质组.txt”输出文件，您将看到为一个蛋白质组列出的所有蛋白质。如果一个组列出了多种蛋白质，这意味着所有这些蛋白质都可能存在于样品中，但是无法检测到蛋白质特异性

将肽冻干或快速抽吸至固体形态，以提高装运期间肽的稳定性。或者，冷冻样品或将其冷藏至4℃，以便冷运液体样品。最小样品量：5-50微克。避免使用洗涤剂、DMSO、甘油和其他非挥发性溶剂。将缓冲液浓度保持在最低水平，因为高盐量会干扰MS中的电离。LC-ESI MS有时可以用于含有少量盐或尿素的样品

在上样到1D凝胶之前，存在不同的方法来增加蛋白质浓度，包括透析、微滤、沉淀和色谱。您可以使用TCA沉淀，但TCA是一种强大的酸，可能导致某些蛋白质的水解和碎裂。通常经常使用冰冻的乙醇/丙酮进行沉淀，它在增加蛋白质浓度的同时可去除大多数盐和缓冲液成分。具体做法是将样品与冷冻的乙醇以100 ul

首先，重要的是要知道2D PAGE的蛋白质样品不应含有高盐浓度，SDS等离子洗涤剂或细胞裂解产生的细胞碎片和DNA。这些会干扰等电聚焦（IEF）并导致凝胶中出现斑点条纹。确保蛋白质浓度约为1-20ug /ul。对于含有许多蛋白质的复杂样品，每个凝胶上的蛋白质上样量应约为50-300微克，纯蛋

凝胶样品—短1D PAGE：将蛋白质样品加载到1D PAGE凝胶上，仅电泳1厘米（200 V时5-8分钟）。用考马斯染色后，将整个染色区域切除为一个样品（2x5mm凝胶片）并将其送去分析。长1D PAGE：将蛋白质样品加载到 1D PAGE 凝胶上，然后照常电泳。用考马斯染色后，将整个染色区

样品量：提供>100ul液体材料，最低浓度为0.1ug/ul。固体材料应提供足够的量，以便准确称量样品。样品纯度：我们可以分析大多数含有蛋白质和肽的样品。避免高蔗糖、尿素（>2M）或盐浓度。不要使用含有甘油和大量伯胺（例如 TRIS 或甘氨酸）的缓冲液，因为它可能会干扰茚三酮反应，从而提供特

通过质谱测定蛋白质需要足够量的蛋白质以获得良好的数据。开发 MRM 定量测定需要纯形式的蛋白质和没有蛋白质的基质样品，该蛋白质与要分析的实际样品的基质相似。因此，请在干净的实验室中准备样品，以避免被人角蛋白污染。您可以寄送液体或冻干形式的蛋白质样品。1.纯化蛋白质/肽：色谱蛋白质/肽纯度应

蛋白质样品可以以液体形式或冻干形式寄送。最小量约为20-50微克。避免使用洗涤剂，并将缓冲液浓度保持在最低水平。HPLC可能适用于含有少量盐或尿素的样品。然而，在没有洗涤剂的挥发性溶剂中，缓冲强度低的情况下可以获得最佳结果。1.将样品放入微量离心管中(使用Eppendorf 管或实验室中的类

通过质谱分析蛋白质需要足够量的纯蛋白质才能获得良好的数据。样品必须在干净的实验室中制备，以避免被人角蛋白污染。蛋白质样品可以以液体或冻干形式寄送。1.纯化蛋白质/肽：色谱蛋白质/肽纯度应为>90%；避免使用洗涤剂，并将缓冲液浓度保持在最低水平。LC-ESI MS适用于含有少量盐和尿素的样品，

1.冻干或溶液样品均可：2.最小样品量：5-50微克。避免使用洗涤剂、DMSO、甘油和其他非挥发性溶剂。将缓冲液浓度保持在最低水平，因为高盐量会干扰MS中的电离，对于含有少量盐或尿素的样品，有时也可以使用LC-ESI MS。然而，在没有洗涤剂的挥发性溶剂中，缓冲强度低，可获得最佳结果。相关服

提交需求

How to order?