蛋白分析FAQ汇总

• • CO-IP实验中的input表示什么意思？

  input表示阳性对照。免疫共沉淀实验中，会直接取细胞裂解液进行WB，用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白，即阳性对照。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • CO-IP实验中用到的两种抗体要同源的还是不同源的？

  建议最好选择两个不同源的抗体。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • 免疫共沉淀实验如何避免假阳性？

  适当降低抗体浓度；选择特异性较好的抗体若抗体特异性不好，则换抗体相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • CO-IP实验中使用的ProteinA/G琼脂糖珠有什么作用？

  ProteinA/G磁珠能特异性的结合抗体FC片段，抗体可以结合与目标蛋白相互作用的蛋白。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • 免疫共沉淀常使用的抗体有哪些？

  常用的单克隆抗体是正常小鼠的IgG；常用的多克隆抗体为正常兔IgG。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • CO-IP设置阴性对照的作用是什么？

  排除抗体非特异性结合的可能。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • 免疫共沉淀实验中如何避免轻重链的影响？

  1、用兔的多克隆抗体IgG做对照；2、用Fab和Fc抗体特异性封闭轻链和重链。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • CO-IP中检测到的与目标蛋白相互作用的蛋白信号太弱是什么原因？

  1、目的蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定；2、裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈；3、样品目的蛋白或相互作用蛋白含量较低。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • IP与CO-IP有什么区别？

  IP利用抗体与抗原（常为靶蛋白）特异性结合将抗原从混合体系沉淀下来，初步分离靶蛋白；CO-IP利用抗体去识别两个相互作用的蛋白质的其中一个，从而将两个相互作用的蛋白一起沉淀下来。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • CO-IP与Gst pull-down有何不同？

  CO-IP利用抗原抗体相互作用的原理沉淀两个相互作用的蛋白质；Gst pull-down则是利用带GST标签的重组蛋白，与目的蛋白进行孵育，最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析