蛋白分析FAQ汇总

• • 哪些细胞适合SILAC分析?

  许多转化的细胞系都适合SILAC分析。 相关服务: SILAC技术

• • 做免疫共沉淀实验时，抗体、磁珠和样品的加样顺序？

  可以先加样本和抗体进行反应，然后加磁珠；或者先加抗体和磁珠，然后再加入样本。不推荐同时加入样品、磁珠和抗体，同时加入三个组分可能会使最终的结果变差。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

• • 常用的蛋白质纯化的方法有哪些？

  蛋白质纯化是将目的蛋白从其他组分中分离出来，往往是进行蛋白质分析不可或缺的一步。常用的纯化蛋白质的方法有凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析和亲和层析等。相关服务:SDS-PAGE蛋白质纯度分析

• • 分子筛纯化蛋白前如何净化样品？

  在色谱分离前对蛋白样品进行离心或过滤，离心可以去除绝大多数块状物，如果离心后效果不明显还可用醋酸纤维薄膜或PVDF滤膜进行过滤。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • SEC实验中溶液交换不充分是什么原因？

  可能是由于样品上样量太多，可将样品分成几份，并控制上样时间间隔。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 如何提高SEC分子筛纯化蛋白的分辨率？

  1、提高色谱柱装填均匀度；2、适当提高柱床高度；3、减少上样体积，控制最大上样体积不超过柱体积的30%；4、保持样品与洗脱液的黏度相同；5、根据样品特点来调节洗脱溶液的离子强度或亲水性。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 如何提高SEC色谱峰对称性？

  提高色谱柱装填均匀度；更换干净无污染的色谱柱。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 怎么避免SEC谱图出现肩峰？

  避免柱床松动、柱筛板堵塞或柱干裂的情况发生。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 离子交换色谱的蛋白纯化效果不佳是什么原因？

  1、离子交换填料及粒径不合适；2、离子交换柱的起始缓冲液没有充分平衡；3、洗脱流速太快；4、样品溶液黏度不合适。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 样品比较浓稠可以做离子交换色谱吗？

  可以，但是要降低上样流速。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）