代谢组学FAQ汇总

• • 多肽合成—肽纯度和肽含量有什么区别？

  肽纯度是由HPLC确定的靶序列的百分比。在肽中发现的杂质包括缺失序列、截断序列和不完全脱保护序列。肽含量可以根据序列以几种不同的方式测定，并且是对存在的天然肽与非肽组分的测量。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—不同纯度的合成肽所适用的研究分别是什么？

  >75%，最好是>85%：免疫学应用、多克隆抗体生产和非灵敏筛选； >90%：SAR研究，生物测定； >95%：体外生物测定，如酶联免疫吸附测定，酶学，生物活性； >98%：晶体学、核磁共振或敏感生物测定等结构研究。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—如何选择以哪种形式合成多肽？

  常用的多肽合成形式有TFA盐形式、乙酸盐或盐酸盐形式。通常所有肽都以TFA盐的形式合成。对于用于细胞测定或动物研究的多肽，应该考虑通过将其转换为乙酸盐或HCl盐形式（TFA<1%保证）来去除TFA盐，以避免异常反应。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—合成的多肽应选择什么类型的末端修饰？

  默认情况下，化学合成的肽在N端有游离胺，在C端有游离酸。N-端乙酰化和C-端酰胺化是不带电的，这降低了肽的总电荷，因此溶解度可能降低。但是这样的修饰也是有必要的，因为它模仿了肽的天然结构。此外，还增加了肽的代谢稳定性及其抵抗氨肽酶、外肽酶和合成酶酶降解的能力。通过增强它们进入细胞的能力从而提

• • 多肽合成—抗体生产的合适肽长度是多少？

  通常，推荐抗体多肽的长度为10-25个残基。较长的肽可能具有更多的表位，但也更有可能形成非天然形式的稳定二级结构。肽长度太短（<10aa）通常也不好，除非有合理的原因，例如与相关家族成员或其他蛋白质的潜在序列同源。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—为什么肽与载体蛋白的结合是必要的？

  因为大多数肽的分子量太小，无法在动物体内产生免疫反应。与载体蛋白如KLH、BSA或OVA的结合不仅会增加抗原的大小，还会增加其免疫原性。肽中需要半胱氨酸以实现高效结合。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—化学合成的多肽在冰箱里能保存多久？应该如何储存？

  对于长期储存，最好以固体形式保存在<-15°C的冰箱中。如果在室温下储存，一些含有蛋氨酸或半胱氨酸的肽可能会开始降解。因此，我们建议您在收到包裹后尽快将它们存放在-20°C。 在-20°C或-80°C条件下，肽会在开始降解之前保持有效6个月或几年。对于短期储存，4 °C就足够了。应保护肽免受

• • 多肽合成—肽储存过程中会发生什么？

  一些典型的降解反应或外消旋化可能包括 Met、Trp、Tyr 或 Cys 的氧化。Asn、Gln 和 C 末端酰胺可能发生脱酰胺作用。可能还会出现天冬酰胺、Asn-Pro分裂、N端Gln形成焦谷氨酰胺以及色氨酸和酪氨酸的二聚体等现象。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—肽溶于水吗？

  常见的非极性、疏水性的氨基酸有：丙氨酸(A)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)。含有50%及以上疏水或非极性残基的多肽可能不溶于或仅部分溶于水溶液。在这种情况下，首先将疏水肽溶解在 50% (v/v) DMSO、DMF 或乙腈的小体积水中。 然后加入水或缓冲液至所需浓度。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—将合成肽保持在溶液中的最佳方法是什么？

  溶解的肽比冻干的干粉更不稳定。 溶液应在冷冻前分装，以避免解冻-再冷冻循环。由于可能的氧化作用，含有天冬氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、酪氨酸的多肽可能不太稳定。储存的溶液应放在干燥的有机溶剂中，以避免过早水解。PH为5~7的缓冲液对成分的稳定性最好。带细胞培养的多肽(>95%的高