代谢组学FAQ汇总

• • 多肽合成—为什么溶解的多肽会失去生物活性？如何防止多肽失去生物活性？

  蛋氨酸的氧化可能是多肽活性丧失的主要原因。亚砜的生成速率与序列有关。最好的方法是用其稳定的同工酶NLE取代蛋氨酸。含有硫基酪氨酸的多肽可能会因为脱硫而失去活性。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—如何溶解含有二硫键的多肽？

  对于含有二硫键的多肽，应避免使用碱性缓冲液。含有游离硫醇基团的多肽在储存过程中可能会氧化形成二聚体或低聚物，即使是在低温下冷冻干燥的干粉也是如此。在中性或微碱性 pH 值下，很容易形成二硫键。二硫键的形成是可逆的， 使用 DTT 可以在碱性条件下还原二硫键。 pH 7-9.5 是 DTT 还

• • 多肽合成—如何溶解含有游离半胱氨酸的肽？

  含有单个游离半胱氨酸的肽将在 pH>7 时被氧化形成二聚体。 这种氧化可以恢复。 含有两个或更多个硫醇部分的肽可在氧化时产生产物混合物。pH 7.5-8 是二硫键形成的最佳条件。 因此，含有游离半胱氨酸的肽最好溶解在脱气溶剂中，例如 缓冲液 pH<7，稀乙酸，0.1% 三氟乙酸的乙腈水溶液。

• • 多肽合成—可以将游离肽或含有游离酸的肽转化为肽酰胺吗？

  不能，一旦合成肽，C-末端羧基就不能转化为甲酰胺。 肽酰胺必须以不同的方法合成和裂解。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—合成的肽如何纯化？纯度如何？

  通过SPPS获得的肽通常通过 RP-HPLC 纯化。大多数肽的 HPLC 纯度为 95% 或以上。对于含有游离 Cys、N 端 Gln 或硫酸化肽的肽，可能会出现较低的纯度。 通过优化合成和纯化方法可以提高纯度。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—您可以合成小肽吗？

  二肽、三肽和其他短肽通常在称为液相合成的溶液中合成。相关服务:多肽合成

• • 代谢组学——代谢组学分析需要多少样本？

  所需材料的最低量：细胞培养物：200万个细胞；微生物颗粒：50 mg；组织：50 mg；生物流体（血浆/血清和尿液）：50 μL；纯蛋白质（蛋白质-代谢物/脂质相互作用研究）：10 μg。相关服务:代谢组学

• • 代谢组学——如何确定提交正确处理的代谢提取物？

  与工作人员讨论您的样品提取方案。相关服务:代谢组学

• • 代谢组学——可以测量样品中的多少种代谢物？

  这取决于生物样品的种类和所遵循的代谢物提取方案。相关服务:代谢组学

• • 代谢组学——是否可以对代谢物进行结构鉴定？

  是的，这在非靶向工作流程中是可能的，但需要额外的时间、数据分析工具和 LC-MS 运行。请参阅下一个常见问题解答，并请提前与工作人员讨论。相关服务:代谢组学