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-宿主细胞蛋白(Host cell protein, HCP)是一类与生物医药制品生产工艺有关的蛋白,会对药品的安全性及药效产生影响。HCP具有潜在的安全风险,作为生物制品中的非目标成分,HCP可能引发机体未知的免疫应答而影响生物制品的功效,甚至引起超敏反应或其他不良反应。因此,通过有效技术
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-宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)是指生物制品中来自生产细胞系的蛋白成分,既包括宿主细胞的结构蛋白也包括宿主细胞分泌的促生长因子等,是具有多种生理化学和免疫学特性的复杂混合物,是一种主要的工艺相关杂质。HCP是一类异质性的蛋白污染,是生物制品中无法避免的一类杂质,可
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-宿主细胞蛋白(HCP,Host Cell Protein)是在生物制药(如生产重组蛋白药物、单克隆抗体)工艺过程中所产生的杂质,其超过一定含量则很有可能会引起免疫反应或其他不良反应。因此,HCP残留量检测是抗体药物产品研发与质控中最常进行的分析项目,HCP残留数值越低,则产品质控越好。
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-GST pull-down是利用重组技术将探针蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶蛋白(glutathione-S-transferase,GST)融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合,从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。GST-pul
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-Edman降解(Edman degradation)是从蛋白质多肽链的N末端测定氨基酸残基的序列,从而对蛋白质一级结构进行鉴定的方法,其本质是通过化学反应循环运行进行氨基酸鉴定。Edman降解法原理包括通过苯基异硫氰酸酯(PITC)与蛋白质或多肽的N-端残基的偶联、苯氨基硫甲酰酞(PTC-
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-氨基酸序列测定是了解蛋白质性质和功能的重要途径,N端区域又是蛋白质及多肽重要的结构和功能部位,其序列特异性很高,通过N端残基的鉴定可以对大多数蛋白质进行鉴定。蛋白N端测序方法主要分为两大类,即质谱技术和非质谱技术,非质谱技术主要是经典的埃德曼(Edman)降解法。
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-Edman降解(Edman degradation)是鉴定蛋白质一级结构的化学方法,是测定蛋白质、多肽或者氨基酸残基序列的一种技术。
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-Edman降解是从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程,利用Edman化学反应从蛋白质的N末端将α残基依次降解再对氨基酸进行鉴定。
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-翻译后修饰(PTMs)和翻译后结构的加工只能通过蛋白水平的直接分析来展现,这些对蛋白的研究是迫切需要的。相较于没有发生修饰的蛋白,PTMs会导致特定序列分子量的增加,使得蛋白水平的分析较为困难。
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-Edman降解法(Edman degradation)测序实验中,经过SDS-PAGE电泳分离后的蛋白质样品需经过“转膜”步骤,从PAGE胶转移到PVDF膜上固定,才能接着使用Edman降解法进行下一步的测序。
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