如何进行N-糖的分析?

    N-糖分析从糖蛋白释放聚糖开始。N-糖分析通过使用特定的N-糖苷酶F对样品进行消化,从而实现有效的去糖基化。释放的N-糖用荧光染料标记,并通过高分辨率HILIC-UPLC-FLR进行分析。HILIC-UPLC具有极高的分辨率,可轻松识别N-糖基化谱的细微变化。通过荧光法进行分析,可以实现定量分析,因为每个N-糖只用一个荧光染料分子标记。通过相应峰面积的计算可以获得不同聚糖种类的分析。

     

    由于HILIC相的立体选择性,相同质量数的N-糖可以被区分。例如,唾液酸的3-或6-和2,3或2,6键上的半乳糖基化可以通过它们的保留时间来区分。

     

    HILIC与 ESI-QTOF-CID-MS/MS 结合进行N-糖分析,可根据样品的特征片段谱图和与谱库匹配,从而实现N-糖结构的鉴定。因此,包括平分型GlcNAc、触角型GlcNAc或多余的GalNAc的等压N-糖的进一步区分也是可行的。

     

    与荧光法相比,质谱法需要多种电荷态和不同数量的同位素才能进行定量分析。即便如此,也无法保证相同的电离效率,因而质谱定量较多的应用于物化性质相似的N-糖。

     

    百泰派克生物科技采用荧光和质谱两种方法,结合它们各自的优势进行N-糖基化分析。并提供可靠、快速的生物学相关糖基化参数的量化和计算。每个样品将被汇编在结果报告中,其中包括荧光色谱图,有关样品和应用方法的信息,测量和计算的具有生物学相关性的N-糖基化参数,如唾液酸化,岩藻糖基化,高甘露糖含量,触角等。为了验证,运行标准的性能受到监控并包含在报告中。

     

    除了N-糖分析,百泰派克生物科技还进行O-糖基化分析。这是通过化学释放O-糖和用2-AB标签标记后荧光峰的定量来完成的。

     

    百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家

    北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务,业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台,服务3000+企业,10000+客户的选择,致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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