百泰派克生物科技BTP客户案例：通过质谱N端测序鉴定SPase，研究SPase在枯草芽孢杆菌中的表达情况
期刊：Microbial cell factories；影响因子: 6.4963
原文链接：DOI：10.1186/s12934-017-0842-2
研究对象：蔗糖磷酸化酶（SPase）
研究目的：SPase在枯草芽孢杆菌中异源表达研究
研究手段：质谱分析蛋白N端序列等
研究内容及结论：曲二糖作为一种益生元和α-葡萄糖苷酶抑制剂，在食品和医药领域具有广泛的应用前景；然而，从自然界中大规模分离和提取曲二糖是困难的。蔗糖磷酸化酶（SPase）可用于曲二糖的生产。目前SPase仅在大肠杆菌中异源表达，不适合应用于食品工业。然而，枯草芽孢杆菌通常被认为是一种安全的有机体，可能对SPase表达有用。该研究首次在一株食品级枯草芽孢杆菌（B. subtilis strain）中异源表达了Bifidobacterium adolescentis SPase。结果表明，在缺乏信号肽的情况下，SPase能有效地分泌到细胞外介质中。重组菌株在3-L生物反应器中培养后，粗SPase产量和活性分别达到7.5 g/L和5.3 U/mL。这些结果为利用重组SPase大规模制备曲二糖提供了基础。
通过质谱N端测序对蔗糖磷酸化酶进行鉴定，该服务由北京百泰派克生物科技提供。结果显示，胞外SPase和胞内SPase的N端序列完全相同。
参考文献：Wang M, Wu J, Wu D. Cloning and expression of the sucrose phosphorylase gene in Bacillus subtilis and synthesis of kojibiose using the recombinant enzyme[J]. Microbial cell factories, 2018, 17: 1-9.
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