蛋白分析FAQ汇总
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分批送样可能会对高通量测序结果产生影响,但这种影响可以通过严格的实验设计、操作标准化、测序平台选择和数据处理来降低。在实际操作中,尽量减少分批次送样,或者在实验设计阶段充分考虑分批效应,以减少其对实验结果的影响。
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"1.采血:首先,需要采集血液样本。你可以采用动物或人类血液样本,但需要遵循相关的伦理和实验室规定。 2.分离血清:将采集到的血液放置在试管中,使其自然凝固,通常需要大约30-60分钟。随后,将凝固的血液样本离心(约2000-3000 g,10-15分钟),以将血清与凝块分离。
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• 用GST融合蛋白转染进293T细胞,将细胞用裂解液裂解。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化,洗脱后用western blot分析可以吗?
你描述的GST pull-down实验的方法是可行的,具体步骤包括:利用GST融合蛋白转染293T细胞,通过裂解液裂解细胞,利用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化GST融合蛋白以及可能与其相互作用的蛋白,然后用Western blot方法进行分析。详细的步骤如下: 1.转染293T细胞:通过将带有
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• 做出某蛋白的一个位点有较强的功能,但该位点有多个修饰。那我应该如何分析这个位点的功能是因为哪个修饰而有的?
要理解蛋白质位点的功能是因为哪个修饰而产生的,首先需要知道这些位点上存在哪些修饰,然后通过各种实验方法探讨每种修饰对蛋白质功能的影响。希望以下建议可以帮助到你: 1.收集数据:首先你需要对每个修饰的具体信息有足够的了解,包括修饰的类型(例如磷酸化、乙酰化、甲基化等)、修饰的位点以及修
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在蛋白质组学差异分析中,评估蛋白质表达差异最显著通常依赖于统计分析和生物信息学方法,涉及的大致步骤如下: 1.蛋白质定量:首先需要对样本中的蛋白质进行定量分析。这通常通过质谱分析、蛋白质芯片或其他定量技术完成。 2.统计分析:对蛋白质的定量结果进行统计分析,比较不
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• 蛋白互作跟蛋白表达量有关系吗?如果两个蛋白有互作关系,但是蛋白a会抑制蛋白b表达,这个是矛盾的还是可能的呢?应该怎么解释呢?
蛋白质的互作和蛋白质的表达量确实有关系,但这种关系并不一定是直接的。蛋白质的互作通常涉及到两个或多个蛋白质之间的物理接触,例如通过形成复合体。因此,如果一个蛋白质的表达量太低,可能就不足以形成有效的蛋白质复合体,从而影响蛋白质的互作。 然而,蛋白质A抑制蛋白质B的表达,并不一定意味着
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• 请问如何在MaxQuant分析结果中查看鉴定到的unique peptide的数目?谢谢
MaxQuant是一种广泛使用的定量蛋白质组学软件,它能够分析来自质谱数据的蛋白质和多肽。 在MaxQuant的输出结果中,可以在"peptides.txt"这个文件中找到鉴定到的独特多肽(unique peptides)的信息。"peptides.txt"文件包含了每
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• GST pull-down蛋白相互作用分析:亲,这个有具体步骤吗?
GST pull-down是一种常见的蛋白质相互作用研究方法。其原理是GST标签能与还原型谷胱甘肽(GSH)紧密结合,在GST pull-down实验中,就是利用这种特性,将一个蛋白质("bait"蛋白)与GST标签融合,然后通过GST标签和谷胱甘肽的结合将目标蛋白固定在谷胱
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• 您好 请问蛋白溶液打质谱有什么要求呢?裂解液可以吗?需要多大浓度和多大体积的蛋白样呢?
对于蛋白质质谱分析,确实有一些特定的样品处理和制备要求。一些关键的注意点包括: 1.纯度:理想情况下,样品中的蛋白质应尽可能纯净。不纯的样品可能导致一些峰的产生,这可能会干扰或掩盖目标蛋白的质谱信号。 2.裂解液:裂解液中常含有盐、表面活性剂或缓冲剂等,这些可能会
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• 你好,想请教一下,分离提取完整细菌细胞壁可以采用什么方法呢?就是只需要杆菌的一个棒状外壳
提取完整的细菌细胞壁是一项具有挑战性的任务,因为这需要在去除细胞内部的所有内容物的同时尽可能不损坏细胞壁。提取完整细胞壁的方法根据裂解手段可以大致分为碱性水解法、酶解法、化学法、超声法和机械法等。 1.碱性水解法:将细菌细胞壁置于碱性溶液中(如氢氧化钠或氢氧化钾),通过
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