蛋白分析FAQ汇总
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• 用质谱检测糖基化,能否根据糖型组成分析单个糖在组间的差异
当然可以!利用质谱(MS)进行糖基化分析,确实可以根据糖型(Glycan)组成来分析单个糖(Monosaccharide)在不同组间的差异。这种分析通常需要配合液相色谱(LC)或者气相色谱(GC)进行,也就是所谓的LC-MS或GC-MS。 这些技术的一般流程是:首先通过酶解或化学方法
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• 您好,想问一下,切胶回收蛋白,可以只做质谱分子量吗?这样我是不是要跑非变性的胶?尽量保证蛋白的完整性?
切胶回收的蛋白样品当然可以用来做质谱分析以测定分子量,这是质谱在蛋白质组学中的一个常见应用。 质谱分析通常需要将蛋白质进行酶切,生成肽段,然后通过质谱仪进行检测。在这个过程中,蛋白质的三维结构会被破坏。因此,对于质谱分析来说,使用非变性胶或变性胶并没有本质区别。然而,在
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CD (圆二色光谱)是生物制药研究和开发中广泛使用的仪器,通常用于研究蛋白质等生物大分子的结构。专门用于处理和分析圆二色谱数据的软件有多种。具体的软件选择可能会根据你的具体需求和个人偏好有所不同,但下面是一些常见的圆二色谱分析中可能用到的软件:1.数据预处理:在分析之前,需要对原始数据进行预
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首先,我们需要了解二级质谱(MS/MS)的基本概念。质谱通过测量带电粒子(离子)的质量(m)和电荷(z)比值来鉴定化合物的结构和组成。二级质谱是质谱的一种延伸,它首先对目标离子进行选择,然后对这些离子进行碎裂,生成一系列子离子,最后对这些子离子进行质谱分析。这种技术可以提供更多关于目标化合物
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MALDI-TOF MS(基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱)的原始谱图去卷积化是一个对复杂数据进行简化的过程,目的是获取尽可能清晰和明确的谱图,以便于识别和定量各种物质。去卷积化通常通过计算机软件完成,主要步骤如下: 1.选择合适的去卷积软件:许多质谱仪供应商会提供与其设备配套的
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• 你们会做蛋白互作突变体构建吗,一般突变体构建引物设计是怎么设计的?
蛋白质互作突变体构建通常涉及对特定氨基酸位点进行点突变,通常需要设计特定的引物来引导突变的发生,即使用PCR的方法来引入点突变,这种方法通常被称为位点定向突变。 在设计位点定向突变引物时,需要遵循以下几个步骤: 1.选择突变位点:首先,你需要知道你希望在DNA序列中引入哪种突变
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• Blue native跑类囊体复合体蛋白,分离不开什么原因,超级复合体堆积
Blue Native PAGE (BN-PAGE)主要用于研究蛋白质复合物的组成和结构,尤其是膜蛋白和大型蛋白质复合物。如果您发现在进行BN-PAGE时,类囊体复合体蛋白的超级复合体无法分离,可能存在以下几个原因: 1.样品处理不当: 蛋白质样品的制备和处理是BN-PAGE成功的关
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• 从植物种子中纯化了蛋白酶,具有转化特定反应活性。但数据库里并没有该酶的比对信息,该怎么鉴定这个蛋白
文章描述了一种综合策略来鉴定从植物种子中纯化出的未知蛋白酶。此策略结合了生物化学、分子生物学和生物信息学技术,旨在确切识别和功能性描述这种蛋白酶。
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• 测的是IOD值吗?用imagej分析灰度值?然后用目的蛋白灰度值除以所有蛋白灰度值得到的百分比就是纯度吗?
IOD(Integrated Optical Density)值,即积分光密度,是对特定区域内的光密度的积分值,一般用于分析图像中的色彩或灰度分布。在 SDS-PAGE 蛋白质纯度分析中,可以用来测量特定蛋白质条带的强度,而这个强度通常与蛋白质的含量成正比。在SDS-PAGE分析中,我们通常
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• 你好,看您发了关于磷酸化和普通蛋白WB做法的不同,能麻烦您发一份磷酸化wb步骤吗?
磷酸化Western Blot(WB)的步骤主要包括以下几个部分:样品制备,SDS-PAGE,转膜,封闭,抗体孵育以及检测。在磷酸化WB中,通常还需要进行一些特殊步骤以防止蛋白质去磷酸化。1.样品制备:提取含有目标蛋白的细胞或组织样本。为了防止蛋白质去磷酸化,通常需要添加磷酸酶抑制剂。2.S
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